树突状细胞分析.ppt

第三讲 树突状细胞（dendritic cell，DC） 主讲人：单远 引言 树突状细胞(dendritic cell，DC)是由美国学者Steinman于1973年发现的，因其成熟时伸出许多树突样或伪足样突起而得名。 DC是目前所知的机体内功能最强的抗原提呈细胞，最大的特点是能够刺激初始T细胞(naive T cell)进行增殖，与此相比，M?、B细胞仅能刺激已活化的或记忆性T细胞。因此，DC是机体免疫应答的始动者，在免疫应答的诱导中具有独特的地位。 对DC的研究不仅有助于深刻了解机体免疫应答的调控机制，而且可以通过调节DC的功能来调节机体的免疫应答，对感染、肿瘤、移植排斥、自身免疫性疾病的发生机制的认识和防治措施的制定，具有重要意义。 因此，DC在机体免疫应答中的作用及其与某些疾病发生和防治的关系，正受到高度关注。 一、树突状细胞的来源 树突状细胞(DC)主要起源于骨髓中CD34+多潜能造血干细胞(CD34+Hematopoietic progenitor cell，简称CD34+HPC)，它经过4个阶段分化成为成熟的DC： ①骨髓和血液中的前体DC； ②外周非淋巴组织中的不成熟DC； ③流出淋巴液和血液中成熟过程中的DC； ④次级淋巴组织中的成熟DC。 近年研究发现，CD34+HPC在GM-CSF和TNF-α作用下沿三条不同的路线向成熟的DC分化。 值得注意的是： CD14+单核细胞分化成的不成熟DC，保留有M-CSF受体。但是，当其发育成熟后，M-CSF受体随即消失。 因此，比较统一的看法是：CD14+单核细胞在不同环境下，发育成不同的细胞。 ①在GM-CSF和IL-4作用下，发育成DC。 ②在GM-CSF和M-CSF作用下，发育成巨噬细胞。 树突状细胞的来源 二、DC的共同特征和表面标志 成熟的DC来源和组织分布不同，但具有下列共同特征： DC表面表达与病原微生物结合的受体(PRR)、FcR 等，参与捕获抗原和免疫复合物。 DC高表达B7-1和B7-2，二者与T细胞表面CD28/CTLA-4相互作用，这是DC高效提呈外源性抗原，并提供T细胞第二活化信号的必要分子基础。 DC表达ICAM-3/CD50、CD40、CD44以及?1和?2整合素家族成员(VLA-5除外)，这些标志性分子的表达与DC的抗原提呈功能有密切关系，它们通过与相应受体或配体的相互作用，可使细胞表面的负电荷减少，从而介导细胞间的N粘附，促进DC与T细胞的接触。 目前从人胎肝、脐血、骨髓、成人外周血以及小鼠的骨髓和外周血中均分离出髓系前体，其功能在于产生各种髓系DC。在体内，这些前体的作用可能是维持非淋巴组织内DC的数量达到一定水平。 外周血单核细胞(Mo)被认为是M?和DC的共同前体，在体外能在某些细胞因子存在的条件下直接发育为DC。在体内它们有可能趋化至炎症反应部位，并受到炎症刺激因素及某些细胞因子的影响而发育为DC或M?。在急性炎症状态下，DC前体均能迅速动员至非淋巴组织。 髓系DC在从前体发育为具有强免疫刺激功能的成熟DC的过程中，需经过一个未成熟阶段，此阶段DC的功能对免疫应答十分重要。 未成熟DC主要存在于多种器官及非淋巴组织上皮，能表达一些膜受体如Fc?RII、甘露糖受体等，介导DC摄取抗原。未成熟DC也能通过吞饮和吞噬作用摄取抗原。未成熟DC内含有一些重要的细胞器包括内体、MIIC和溶酶体等，能合成MHC-I类分子。 此外，未成熟DC还能分泌一些趋化性细胞因子、具有炎症介质作用的细胞因子，如LC能产生TNF-?、IL-1、IL-6、IL-15等。 成熟期DC主要存在于淋巴结、脾及集合淋巴结。它们受趋化性细胞因子的作用，归巢至T细胞区，同时本身也分泌一些趋化性细胞因子，从而保持与T细胞的接触。 成熟DC的细胞表型特征是高表达MHC-II 类分子、MHC-I类分子、CD80、CD86、CD40、ICAN-1和HSP等免疫刺激分子，CD1a、CD11c及CD83也是成熟DC的标志。由于它们表达高水平抗原肽:MHC分子复合物、高水平辅助刺激分子CD80、CD86及CD40等，并且能分泌IL-12，尤其是在CD40L作用下，能分泌Th1型细胞因子，因此它们能有效地将抗原提呈给初始T细胞并使之激活。 四、分布及分类 DC广泛分布于机体所有组织和器官中，根据其分布部位不同可分为三类： 1．滤泡树突状细胞(follicular dendritic cell, FDC) FDC是淋巴结浅皮质区和淋巴滤泡内的重要APC，其表面具有树