河北省人感染汉病毒M片段基因特征研究.pdfVIP

中文摘要 河北省人感染汉坦病毒M片段基因特征研究 摘 要 目的：探讨河北省肾综合征出血热患者血清中汉坦病毒 的基因型别，分析人感染汉坦病毒基因型的分布和变异情 况，为预防和控制肾综合征出血热在河北省的流行提供科学 依据。 方法： 1通过流行病学调查，收集病人或疑似病人急性期血清 标本； 2采用间接免疫荧光法筛选阳性标本，从中提取汉坦病 毒RNA； 3通过RT-nestedPCR扩增病毒核酸，进行基因分型； 4选择代表性疫区血清标本PCR扩增产物经纯化回收 后进行序列测定，根据G1和G2片段基因序列分别用 DNASTAR软件进行同源序列比较并构建系统发生树，对河 北省人感染汉坦病毒的基因亚型分布、核苷酸变异及特征进 行分析。 结果： 1 2006年河北省共报告肾综合征出血热病例1060例， 发病率为1．55／10万，疫区在全省广泛存在，“个地市均有 发病。主要集中在河北省东北部的唐山、秦皇岛，占全省发 病总数的63，77％；其次为河北省中部和南部的保定、石家 庄、邢台、沧州、衡水；张家口、承德、邯郸、廊坊发病较 低。体现了HFRS高度散发又相对集中的区域特征。 中文摘要 22006年共收集病人或疑似病人血清标本152份，经间 接免疫荧光法(IFA)检测阳性94份，阳性率为61．84％。 份阳性结果，阳性率为24．64％，其中≤7天的标本35份， 0份。 4对河北省汉坦病毒阳性病人血清标本同时用SEO型 和HTN型分型引物进行RT-nestedPCR扩增，显示17份阳性 标本所携带汉坦病毒均为SEO型，未发现HTN型。 5选取有代表性的11份标本进行序列测定，分析表明 其同源性较高，核苷酸变异既有转换也有颠换。汉坦病毒 染汉坦病毒基因变异不大，同型之间M片段的基因序列相对 比较保守。 O、ZTl 等亲缘关系较近外，其余均与SDI 0等的关系较近， 中文摘要 同属于S3亚型。系统进化树分析未发现HTN型汉坦病毒的 存在，此与核苷酸同源性比较的结果一致。 7基因分型及系统进化树分析表明，河北省是典型的 个亚型，分型结果一致，均以s3亚型为主。在地理位置相 近的地区，病毒基因组核苷酸序列同源性相对较高，系统进 化关系较近。这说明河北省人感染汉坦病毒的分布具有一定 的地理区域性。 结论： l用RT-PCR技术直接扩增病人早期血中汉坦病毒是可 行的，可用于早期快速诊断，但需进～步完善，提高检出率。 2从血清标本直接提取汉坦病毒RNA存在一定难度， 但急性期血清相对易于提取，随着发病时间的延长提取率下 降。 3河北省人感染汉坦病毒以SEO型为主，共包括Sl、 S3两个亚型，以S3亚型为主。G1和G2片段分型结果一致， 未发现新亚型。 4河北省人感染汉坦病毒基因变异不大，同型之间M片 段序列相对较保守。 5在地理位置相近的地区，病毒基因组核苷酸序列同源 性相对较高，系统进化关系较近，汉坦病毒的分布具有一定 的地理区域性。 关键词：汉坦病毒；基因型；RT-nestedPCR；M片段： 系统进化树 ——薹查塑墨 ofthe AnalysisGene Characteristicof HantavjrusM segmentHFRS Patientsin among Hebei Province ABSTRACT objective：Tothe