寿尔智胶囊对阿茨海默病模型大鼠神经元突触损伤的保护作用及机制研究.pdfVIP

中文摘要 背景和目的 Di 阿尔茨海默病(Alzheimersease，AD)是一种原因不明的进 行性变性疾病，以记忆和其他认知功能衰退直至发展为严重痴呆为特 征。研究发现：阿尔茨海默病患者的大脑内不但存在有突触数目减少、 结构异常、而且包括功能蛋白(突触后致密区蛋白PSD-95)以及对 突触存活起重要作用的神经生长因子NGF及其受体TrKA、细胞外调 节蛋白激酶ERK都有不同程度的表达异常。迄今为止，尚无对突触保 护特别有效的治疗和预防药物。因此，加强对AD突触的保护研究具 有一定的理论意义。祖国医学认为中药的干预对阿尔茨海默病的治疗 是有效的；根据补肾健脑，活血祛瘀，化痰开窍的治法组方的寿尔智 胶囊，用于治疗阿尔茨海默病取得了确切的疗效。前期的研究显示寿 尔智胶囊在对AD模型小鼠学习和记忆的改善中有多方面的作用机 理，但对其在突触保护方面有无作用未有研究。本研究通过经脑立体 定位仪向SD大鼠海马区注射凝聚态AD：螂，建立阿尔茨海默病大鼠 模型，应用具有补肾健脑，活血祛瘀，化痰开窍作用的中药寿尔智胶 囊进行治疗，观察寿尔智胶囊对阿尔茨海默病模型大鼠行为学、海马 突触超微结构、海马突触后致密区蛋白PSD-95、神经生长因子NGF 以及寿尔智胶囊对它们的影响，探讨突触损伤与AD的发病两者之间 的关系以及寿尔智胶囊在突触保护方面的作用机制。 方法 将实验动物随机分为4组：假手术组、模型组、寿尔智组、盐酸 多奈哌齐组，每组10只。采用经脑立体定位仪向sD大鼠海马CAl区 注射凝聚态AD艄，，建立阿尔茨海默病大鼠模型。造模成功后，治疗 组分别给予盐酸多奈哌齐和寿尔智胶囊进行四周的治疗，同时假手术 组和模型组给予等体积的生理盐水。四周后，运用Morris水迷宫测 试检测大鼠的学习和记忆能力；学习和记忆能力测试结束，行HE染 色对大鼠海马CAl区神经元形态进行观察；用透射电子显徼镜对大鼠 海马CAl区的突触超微结构进行观察；并用图像分析仪测量和分析大 鼠海马CAl区突触界面结构参数；免疫组化法测定海马CAl区突触后 mRNA、 蛋白激酶ERKl、ERK2的表达；RT-PCR测定海马组织PSD一95 NGF mRNA、TrKAmRNA、ERKlmRNA、ERK2 mRNA的表达，并观察寿尔 智胶囊对上述指标的影响。 结果 1．寿尔智胶囊能明显改善AD模型大鼠的学习和记忆能力：定位 航行试验中，与假手术组比较，模型组平均逃避潜伏期明显延长， 差异具有显著性(P0．01)；盐酸多奈哌齐组和寿尔智组大鼠的平均 逃避潜伏期较模型组缩短，差异具有显著性(P0．01)，但是与假手 术组比较，差异不显著(P0．05)；且寿尔智组与盐酸多奈哌齐组相 比无显著性差异(P0．05)。空间探索试验中，与假手术组比较，模 型组原平台象限活动时间明显缩短，差异具有显著性(P0．01)；寿 尔智组和盐酸多奈哌齐组与模型组比较，原平台象限活动时间均明 显延长，差异具有显著性(P0．05)，与假手术组比较，差异不显著 (PO．05)；且寿尔智组与盐酸多奈哌齐组相比无显著性差异(P O．05)。 2．与假手术组相比，模型组大鼠海马CAl区细胞排列不整齐，数 目明显减少，突触结构损伤较明显；与模型组相比，盐酸多奈呱齐 组和寿尔智组大鼠海马CAl区细胞排列较整齐，数目明显增多，突 触结构损伤较轻。 3．与假手术组相比，模型组大鼠海马CAl区突触后致密区厚度变 薄，突触间隙宽度明显增大，差异具有显著性(P0．01)；而盐酸多 奈呱齐组和寿尔智组能逆转上述病理性变化：使海马CAl区突触后 致密区厚度显著变厚，突触间隙宽度明显减小，差异具有显著性 (Po．01)；且寿尔智组与盐酸多奈哌齐组相比无显著性差异(P 0．05)。 Ⅱ 盐酸多奈呱齐组与寿尔智组之间比较差异无显著性(PO．05)．且 NGF在各组海马CAl区中的表达变化无显著性差异(P0．05)． mRNA、ERKlmRNA、ERK2 mRNA表达明显减少(P0．