增液承气汤对津便秘衰老模型小鼠皮肤影响的实验研究.pdf

中文摘要 目的：通过皮下注射D一半乳糖、限水叠加复方地芬诺酯灌胃建立津亏 便秘衰老模型，观察该模型动物相关的皮肤衰老指标，以评价便秘对皮肤 衰老的影响，并通过增液承气汤作用于该复合模型，探讨其对皮肤作用的 可能机制，从现代医学角度诠释中医学“肺外合皮毛，肺与大肠相表里 理论。 方法：将144只2月龄昆明清洁级小鼠雌雄各半随机分为空白组、津 亏便秘组(简称便秘组)、衰老组、津亏便秘衰老组(简称便秘衰老组)、 诺酯(1 0ml 0mg／kg．d)灌胃建立津亏便秘模型，灌胃顺序依次为超纯水(2 ／kg．d)、复方地芬诺酯(10ml／kg．d)、超纯水(补充余量)，间隔3小时； 衰老组每天颈背部皮下注射等量D一半乳糖1000mg／kg造模；便秘衰老组 及其治疗组两法同用建立便秘衰老复合证候模型；空白组以超纯水做对 照；共6周。从第4周开始对增液承气汤组、增液组及西药组进行相应灌 胃处理(将第一次的超纯水改为药液)，持续3周。每周称量体重一次， 实验结束后当天进行宏观体征观察并拍照，次日取材进行如下实验：皮肤 的光电镜检测；小肠墨汁推进率观察；计算大肠和皮肤含水率；此外生化 检测血清和皮、肺SOD、皮和血清HYP；用放射免疫方法检测皮肤组织匀浆 RI／11 检测真皮TGFD mRNA表达。 结果： 1，与空白组比较，便秘组、衰老组与便秘衰老组的各项指标显示有 显著性差异(P0．05)。 在宏观体征观察中各组表现出不同程度的衰老表现如形体消瘦，精神 倦怠，活动后活动量减少，蜷缩聚堆，眯眼，弓背，且皮毛枯槁无光泽； 相比，便秘组还表现出易激惹的症状；便秘衰老组的皮毛最为枯槁，形体 最为消瘦，更急躁易怒。 对组织标本进行检测，结果显示小肠推进率明显下降(P0．01)；大 肠和皮肤含水率下降(P0．01)；皮肤明显变薄，胶原纤维数量减少；皮 肤成纤维细胞存在明显线粒体水肿，异染色质发生边集，常染色质淡染或 核染色致密成团的超微结构改变；血清、皮肤及肺组织中SOD活力明显下 TGFRI／II D 不大(PO．05)，相比便秘衰老组变化程度较大。 2、与便秘衰老模型相比，增液承气汤和增液汤对该模型小鼠的宏观 体征如爪的形态、活动度等有一定改善，进食量和体重也有所增长，表现 为爪甲淡红；西沙必利组小鼠仍爪甲偏红。 对组织标本进行检测，结果显示增液承气汤、增液汤治疗、西沙必利 对便秘衰老复合证候模型小鼠小肠推进率，血清、皮肤组织中SOD活力和 RI／II HYP含量，皮肤AQP3和肺AQPl表达，真皮TGFD mRNA表达，有显 效果明显不及增液承气汤和增液汤(P0．05)。表现为增液承气汤组小鼠 大肠和皮肤含水率明显增加(P0．01)；小鼠皮肤明显增厚，真皮胶原纤 维数量增加，皮下脂肪填充减少；成纤维细胞损伤明显减轻，其核内染色 质分布较均匀，核膜下异染色质聚集，胞浆内可见大量粗面内质网及线粒 TGFRI／II D mRNA表达强度明显增加(P0．01)。 结论： 一 1、便秘可导致皮肤衰老、加促皮肤衰老进程。 2、D一半乳糖皮下注射法复合“灌水+复方地芬诺酯灌胃+灌水的“三 明治法构建的小鼠模型是一种易于掌握、重复性高的津亏便秘衰老 复合病证模型。 3、增液承气汤具有明显的增水推舟、泄热通便功效，并能较好改善便 秘衰老模型动物的宏观体征。 4、机体自由基的清除能力下降、SOD活力下降，HYP含量降低、TGF- 侈RI／Ⅱ信号转导通路受阻；皮肤组织HA含量减少、AQP3表达下调， 可能是津亏便秘衰老模型小鼠皮肤菲薄、干燥的病理机制。肺组织AQPI 表达下降与SOD活力低下可能是津亏便秘衰老模型小鼠皮肤老化的中 间环节。 5、增液承气汤可有效改善证候模型小鼠的皮肤老化与皮肤组织改变， 其作用机理可能与加强清除自由基，减少组织损伤；唤醒TGFD信号转 导通路，促进成纤维