淋球菌外膜蛋白I的克隆、序列分析及表达.pdf

四川火学硕十论文 淋球菌PI基因的克隆、序列分析及表达 淋球菌PI基因的克隆、序列分析及表达 摘 要 硕士研究生：汪东篱 导 师：裴晓方副教授 目的构建淋球菌PI基因T-A克隆重组载体，对PI基因进行序列分析，以寻找 PI基因抗原稳定性位点；构建PI基因表达重组子，诱导表达及纯化重组PI蛋白， 研究重组蛋白的功能，为后续PI蛋白免疫学特性的研究、抗体制备，及淋病疫苗 研制奠定基础。 方法本文分为四个部分，分述如下： 第一部分淋球菌标准株PI基因克隆重组子的构建：提取淋球菌标准菌株 端加A，并与pBS-T线性载体连接，连接产物转化Dtt5碰感受态细胞，经氨卞青霉 素抗性筛选和蓝白斑筛选，挑取白色菌落用于质粒提取，用＆胡I和Xhol双酶 切所得质粒，初步鉴定阳性克隆。 第二部分PI基因序列分析：测定1中所得阳性重组子的PI基因序列，用 基因序列进行多序列同源性比较，分析标准株与临床株序列间差异；对6条序列 的氨基酸序列进行多序列同源性比较，将本研究结果与他人的研究进行比较