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(1)萃取蛋白质:利用反胶团萃取技术处理蛋 白质或其混合物,包括α-淀粉酶、细胞色素c、核糖核酸酶、溶菌酶、α-胰凝乳蛋白酶、过氧化氢酶等。 例:浓缩α-淀粉酶、分离蛋白质混合物 (2)日化行业中用于化妆品原料及功能性添加剂(植物油、氨基酸、维生素)的提取。 (3)在药物中的应用:主要是对各种蛋白质、抗体、抗生素的萃取。 (4)温度对蛋白质稳定性的影响 一般说来,温度的增加将使反胶团的含水量下降,因而不利于蛋白质的溶解。 因此通过提高温度可以实现蛋白质的反萃取。然而,由于蛋白质的活性对温度的变化较为敏感,因此该方法的应用受到了一定程度的限制。 另外,温度会明显影响相转移的速度和效果。 (5)溶剂体系的影响 溶剂的性质(尤其是极性)对反胶团的形成和大小都有影响。 常用的溶剂是烷烃类(正己烷、环己烷、正辛烷、异辛烷等)。 有时也使用助溶剂,如醇类。可以调节溶剂体系的极性,改变反胶团的大小,增加蛋白质的溶解度。 反胶团萃取技术的应用 反胶团萃取分离3种蛋白质(核糖核酸酶、细胞色素C、溶菌酶) 表面活性剂:AOT;有机相:异辛烷 利用离子强度和pH值调节蛋白质的溶解度差异。 当pH=9,[KCl]=0.1M时,核糖核酸酶不溶于胶团,留在水相。 进入有机相胶团中的细胞色素C和溶菌酶用pH=9,[KCl]=0.5M的水溶液反萃取,只有细胞色素C进入水相。 仍留在有机相中的溶菌酶再用pH=11.5,[KCl]=2.0M的水相反萃取。 反胶团萃取实例 核糖核酸酶不溶于胶团,留在水相。 反萃取,只有细胞色素C进入水相。 反萃取 1.混合澄清槽 —— 应用最广 设备由料液与萃取剂的混合器和用于两相分离的澄清器组成。可进行间歇或连续的液-液萃取。 但该设备最大的缺点是反胶团相与水相相混合时, 混合液易出现乳化现象,从而增加了相分离时间。 反胶团萃取装置 混合澄清槽 —— 连续萃取 装置由两个混合-澄清单元组成 2.转盘萃取塔 转盘萃取塔(RDC)可用于蛋白质的萃取分离。 下图是RDC萃取蛋白质的示意图,反胶团相为分散相,水相为连续相。 转盘塔的优点是单位塔高的效率高、产量高、操作弹性大和低能耗等。 缺点是体系易出现乳化和返混现象。 研究进展 反胶团萃取分离技术工艺流程简单,可实现规模化连续操作,分离效率高且能耗低,但目前还没有合适的分离设备应用于生物产品分离,这在一定程度上限制了其工业应用。 与传统分离方法相比,反胶团萃取技术是一个相对年轻的领域,相信随着研究的深入反胶团技术的应用将更加广泛。 谢谢观看! * * 非极性有机溶剂 极性“头” 极性的“核” * 胶 团 萃 取 与 反 胶 团 萃 取 Review 胶团概念 当向水溶液中加入表面活性剂达到一定浓度(CMC)时,会形成表面活性剂聚集体。 正 向 胶 团 极性“头” 水 非极性的“核” 非极性“尾” 胶团萃取(micellar extraction) 胶团萃取是被萃取物以胶团或者胶体形式从水相被萃取到有机相的溶剂萃取方法。 胶团萃取多用于无机物萃取,但也用于有机物萃取。 被萃取物主要限于金、银、硫酸钡等,溶剂主要限于氯仿、四氯化碳和乙醚等。 反胶团萃取 (reverse micellar extraction) 极性的“核” 反 向 胶 团 反胶团内溶解的水称为微水相或水池 非极性有机溶剂 反胶团萃取技术的产生 传统的分离方法,如液-液萃取技术很难应用于对生化产品(如蛋白质、氨基酸、抗生素等)的提取与分离,原因在于这类物质多数不溶于非极性有机溶剂,或与有机溶剂接触后会引起变性和失活;而盐析、沉淀、层析、电泳等生化分离方法又不能实现连续和放大操作。 因此,针对这两大难题,在20世纪70年代中期反胶团萃取技术就发展起来了。 反胶团萃取的本质仍是液-液有机溶剂萃取,但与一般有机溶剂萃取所不同的是,反胶团萃取是利用表面活性剂在有机相中形成的反胶团,从而在有机相内形成分散的亲水微环境,使物质在有机相内存在于反胶团的亲水微环境中。 反胶团萃取可应用于提取蛋白质、核酸分子的分离纯化、分离金属离子、制备纳米材料、酶催化反应。 反胶团含水率W定义为水和表面活性剂的摩尔浓度之比,即 W可反映反胶团大小,W越大,反胶团半径越大 常用表面活性剂 表面活性剂的存在是反胶团萃取体系的必要条件,主要可分为: (
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