莲草直胸跳甲Hsp70基因克隆及高温表达分析.pdfVIP

９７０ 核 农 学 报　 ２０１４，２８（６）：０９７０ ～０９７７ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＮｕｃｌｅａｒＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ 文章编号：１０００⁃８５５１（２０１４）０６⁃０９７０⁃０８ 莲草直胸跳甲Ｈｓｐ７０基因克隆及高温表达分析 １ ２ ２ １ １ １ 贾　 栋　 刘艳红　 韩　 政　 赵龙龙　 吕向阳　 马瑞燕 １ ２ （ 山西农业大学农学院，山西 太谷　 ０３０８０１； 山西农业大学生命科学院，山西 太谷　 ０３０８０１） 摘　 要：为揭示热激蛋白（ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｈｓｐｓ）基因和莲草直胸跳甲Ａｇａｓｉｃｌｅｓ ｈｙｇｒｏｐｈｉｌａ 温度胁迫适 应性的关系，克隆了莲草直胸跳甲Ｈｓｐ７０基因序列，采用实时荧光定量ＰＣＲ 的方法检测了２５ ～４２５℃ 莲草直胸跳甲成虫体内Ｈｓｐ７０ 的表达情况。 结果表明：所克隆序列含有Ｈｓｐ７０ 家族的典型基序和位点， 并与其它昆虫Ｈｓｐ７０ 的序列相似性很高，其中与马铃薯甲虫的相似性达到９４％，表明所克隆序列为 Ｈｓｐ７０靶基因，并对序列进行了系统进化分析；莲草直胸跳甲Ｈｓｐ７０ 的诱导起始温度为３２５℃（Ｔ ），诱 ｏｎ 导最高温度为３７５℃（Ｔ ）；Ｈｓｐ７０ 的Ｔ 能代表莲草直胸跳甲的耐受极限温度，是揭示物种耐受性的 ｍａｘ ｍａｘ 很好指标。 本研究结果表明Ｈｓｐ７０在莲草直胸跳甲的高温适应性中可能起重要作用。 关键词：莲草直胸跳甲；Ｈｓｐ７０；高温胁迫；实时定量ＰＣＲ ＤＯＩ：１０１１８６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１００⁃８５５１２０１４０６．０９７０ 　 　 喜旱莲子草（Ａｌｔｅｒｎａｎｔｈｅｒａｐｈｉｌｏｘｅｒｏｉｄｅｓ）是一种原 对莲草直胸跳甲存活和生殖等特性等具有显著影 ［１］ ［１０－１１］ 产于南美洲的多年生水陆两栖草本植物 ，目前已经 响 。 以长沙地区为例，进入７月份以后气温逐渐 在热带、亚热带和暖温带地区广泛归化（包括美国、澳 升高，高温期平均在３４℃以上，最高温可达３８～４０℃， 大利亚、新西兰、东南亚各国、印度和中国等很多国家 持续高温要延续至８ 月下旬，这一时期对莲草直胸跳 ［２］ 和地区） 。 由于它能适应不同生境，迅速蔓延且难 甲的发育极为不利，大量成虫死亡，种群数量锐减，喜 以控制，对入侵地的生物多样性、生态系统和社会经济 旱莲子草重新得到恢复。 ８ 月下旬，气温一般在２５ ～ 均造成严重威胁，因而成为全球性的恶性杂草［２－４］ ，被 ３６℃之间，莲草直胸跳甲开始繁殖。 ９ 月至１０ 月气温 ［５］ 我国列为首批１６种重要入侵物种之一 。 在１７ ～２６℃之间，莲草直胸跳甲进入繁殖盛期，种群 莲草直胸跳甲（Ａｇａｓｉｃｌｅｓ ｈｙｇｒｏｐｈｉｌａ），属鞘翅目叶 数量剧增［１２－１３］。