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摘要……………………………………………………………………………………………………，I
英文摘要……………………………………………………………………………………………．III
1前言…………………………………………………………………………………………………1
1．1哺乳动物胚胎干细胞的培养液研究进展……………………………………………………．1
11．1小鼠胚胎干细胞培养液的发展…………………………………………………………～1
1．1．2人胚胎干细胞培养液的发展……………………………………………………………．．2
¨．3大鼠及NOD鼠胚胎干细胞的培养液发展………………………………………………2
1．1．4两种状态的胚胎干细胞转化中培养液的应用…………………………………………．．3
1．2猪多能性干细胞的培养液……………………………………………………………………3
1．2．1猪胚胎干细胞培养液的研究进展………………………………………………………．．3
1．2．2猪诱导多能性干细胞培养液的研究进展………………………………………………．．5
1．3我们所获得的猪胚胎干细胞培养液………………………………：………………………．6
1．3．1l、压孙，培养液的产生………………………………………………………………………6
1．3．2MX、，培养液的应用………………………………………………………………………6
1．3．3
MXV培养液的不足………………………………………………………………………6
1．42i的作用机制和在胚胎干细胞中的应用……………………………………………………．7
1．5研究目的及意义………………………………………………………………………………7
2材料与方法…………………………………………………………………………………………8
2．1材料…………………………………………………………………………………………………………………………～8
2．1．1实验动物和材料…：………………………………………………………………………一8
2．1．2主要的仪器与设备………………………………………………………………………～8
2．1．3主要试剂及试剂盒………………………………………………………………………一9
2．1．4常用试剂及配制……………………………………………………………………………9
2。2实验方法………………………………………………………………………………………12
2．2．1细胞培养……………¨¨…………………………………………………………………．12
2．3胚胎收集和细胞培养…………………………………………………………………………】3
2-3．1卵母细胞体外成熟培养…………………………………………………………………13
2．3．2卵母细胞体外受精及胚胎培养…………………………………………………………】4
2．3．3囊胚接种…………………………………………………………………………………14
2．3．4猪类胚胎于细胞分离与培养……………………………………………………………14
2．4多能性鉴定……………………………………………………～……………………………14
2A．1碱性磷酸酶染色…………………………………………………………………………14
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万方数据
东北农业大学农学硕士学位论文
II ilIili ，一 I量阜詈皇曼等量号量拿
2A．2核型分析…………………………………………………………………………………．14
2．4．3免疫荧光鉴定……………………………………………………………………………．15
2．5其它主要实验方法……………………………………………………………………………15
2．5．】单克隆形成率检测………………………………………………………………
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