实验六 活性污泥中细菌的纯种 分离和培养 一、实验目的 1.了解用平板划线法和浇注平板法分离微生物(细菌)纯种的原理。 2.掌握一些常用的分离和纯化微生物的操作方法。 二、主要内容 在自然界和废水生物处理中,细菌和其它微生物杂居在一起。为了获得纯种进行研究或用于生产,就必须从混杂的微生物群体中分离出来。对于好氧菌和兼性好氧菌可采用平板划线法、平板表面涂布和浇注平板法等方法。 1.平板划线分离法 平板划线分离法是最简便的方法。划线的形式有多种,但其要求基本相同:既不能划破培养基,同时能充分分散细胞以获得单菌落。其中将平板分区划线的形式,可充分利用平板的有效面积,获得单菌落的可能性更大。 2.平板表面涂布和浇注平板法 平板表面涂布和浇注平板法一般都用样品(如活性污泥)稀释液,前者通过涂布棒将菌液(0.2~0.5ml)分散在培养基表面,经培养后获得单菌落;后者是将菌液和培养基混合后培养出单菌落。本实验主要进行平板划线法和浇注平板法。浇注平板法常用于细菌菌落总数的测定。 生物安全操作箱 三、方法与步骤 1.平板划线法 (1)倒平板:经融化的培养基,冷却至50~60℃(可用电热恒温水浴锅)时倒平板,凝固后待用。 (2)划线:可先将皿底分区,左手拿皿底,有培养基的一面朝向煤气灯,右手用接
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