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- 2016-03-28 发布于湖北
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]酵母双杂交ppt.ppt
传统的检测蛋白质相互作用的方法 蛋白质亲和层析 (protein affinity chromatography) 2. 亲和印迹(affinity blotting) 3. 免疫沉淀(immunoprecipitation) 反映的只是蛋白的体外相互作用 蛋白质的相互作用是生命活动的基础,一切生命活动几乎都是通过蛋白质之间的相互作用而实现的。在生物体发育的不同阶段,细胞分裂、分化的不同时期,都离不开蛋白质间的相互作用。近年,随着分子生物学技术的发展,人们对基因的结构和功能的认识不断加深,尤其是基因组研究的飞速进展,为揭示生命的奥秘提供了条件。然而,只凭借基因序列很难认识蛋白质的功能及在整个细胞中所处的位置和作用。由于蛋白质相互作用的复杂性,使得这方面的研究工作进展缓慢。最近兴起的双杂交系统为研究蛋白质的相互作用提供了一套崭新的方法。 酵母双杂交系统的基本原理 双杂交系统的发展 1. 报告基因的多样化 2. 诱饵表达载体 3. 猎物表达载体 报告基因的多样化 针对非核内蛋白质 三杂交系统 依赖于蛋白质的三杂交系统 通过小分子(配体)相互作用的三杂交系统 通过RNA的三杂交系统 负选择系统 双诱饵系统 大规模进行双杂交筛选的方法 双杂交系统的应用及前景 应用 图9? 双诱饵系统 Fig.9? A two-bait syste
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