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二氧化钛纳米颗粒对废水脱氮除磷的效果以及对活性污泥中细菌群落改变的长期影响 熊正1 陈银光* 吴瑞2 同济大学 环境科学与工程学院 污染控制与资源再生国家重点实验室，中国上海市四平路1239号，200092 摘要：二氧化钛纳米颗粒（TiO2NPs）在很多领域的广泛应用引起了人们对其在环境中的潜在影响问题的关注。然而，人们在TiO2NPs对生物脱氮除磷以及活性污泥中细菌群落影响的领域的调查研究确是很少的。本实验是针对TiO2NPs在厌氧序批式反应器处于低溶解氧（0.15—0.50mg/L）环境下对于生物营养物质去除率的影响的评价。研究发现，1—50mg/L浓度的TiO2NPs在与废水经过短期接触（1天）的情况下，对水体脱氮除磷不具有明显的效果。然而，研究观察显示，50mg/L浓度（高于其在环境中的相关浓度）的TiO2NPs却使水体总氮的去除率出现明显的下降，在与废水经过长期接触反应（70天）后，总氮的去除率从80.3%降到24.4%，反之，生物除磷效率却没有受到影响。变性梯度凝胶电泳图谱显示50mg/L浓度的TiO2NPs明显减少了活性污泥中的微生物种群多样性。荧光原位杂交分析结果表明，大量的硝化细菌，尤其是氨氧化菌在TiO2NPs与废水充分接触反应后出现急剧死亡，这也就是氨氧化菌急剧退化死亡的主要原因。进一步的研究显示，50mg/L浓度的TiO2NPs在与废水长期充分接触之后抑制了氨单氧酶和亚硝酸盐氧化还原酶的活性，但是却对外切聚磷酸酶TiO2NPs对于细菌细胞中的聚羟基脂肪酸酯TiO2NPs被广泛的应用在了催化剂、遮光剂和水处理工艺中。[2]这些TiO2NPs的广泛应用无疑会在环境中产生残留。最近，人们在土壤、地表水、排污废水以及城市污泥中均发现有TiO2NPs的存在。[3,4]这些现象使得TiO2NPs对环境的潜在影响逐渐为人们所关注。尽管TiO2NPs目前在环境中的预估浓度只处于ug/L级，[4,5]但是随着它们在大规模产品生产中的应用，TiO2NPs在环境中的残留会持续增加。结果现在许多项研究都在致力于调查研究TiO2NPs在处于mg/L级时对有机体，比如人体细胞[6]、斑马鱼[7]、海洋浮游生物[8]以及微生物[9]等的毒害作用。例如，研究证明，0.14mg/L浓度的Ag NPs就会对硝化细菌的呼吸作用产生抑制作用[10]，但是10mg/L浓度的Cu NPs却不会对氨氧化菌的呼吸作用产生抑制作用[11]。以前的研究工作都是针对纳米材料对细菌呼吸作用的影响的研究。近期的研究表明，ZnO NPs可以对活性污泥产生显著影响[12]。但是其他的纳米材料却不会对活性污泥中的微生物产生有利的影响。尽管有数据显示，在未经处理的废水中发现0.1—3mg/L的Ti存在[13]，但是TiO2NPs对于废水脱氮除磷效率的潜在影响仍然是未知的。 现今人们对TiO2NPs的毒害作用大部分是来源于对有机体模型的研究。西蒙德克尔等人认为TiO2NPs在500mg/L的浓度下与耐金属贪铜菌接触反应24h后仍对其没有影响，与枯草杆菌接触6h后对其生长也没有任何影响。[9]不过这些实验都是TiO2NPs与受试体在短期（通常为1—24h）接触反应后得到的，这样只能表现出TiO2NPs对于细胞活性和细菌模型生长的急性影响。延长接触反应时间（3个月）可以观察出TiO2NPs对人体角质细胞产生一些不利影响，例如减弱细胞线粒体的活性或者失去正常的细胞形态，但是同样浓度下的TiO2NPs在短时间的接触反应下不会体现出对角质细胞的影响[6]。但是只片面的考虑纳米材料的急性影响对于研究纳米材料对环境的潜在危害是不足的。因此评估TiO2NPs对生物脱氮除磷的影响需要从长期接触反应和短期接触反应两种情况来调查研究。 众所周知，活性污泥法处理废水脱氮除磷工艺是靠硝化细菌和反硝化细菌来脱氮，靠好氧菌和厌氧菌来除磷[15,16]。因此，实现高效生物脱氮除磷微生物种群的多样性和稳定的细菌群落结构起着重要的作用然而，到目前为止，TiO2NPs的会影响活性污泥中的细菌群落仍然是未知的。TiO2NPs对废水脱氮除磷效果的影响；（2）通过聚合酶链式反应和变性梯度凝胶电泳相结合的方法TiO2NPs后，活性污泥中微生物群落的变化情况；（3）探索TiO2NPs对细胞内聚羟基脂肪酸酯PHA）和糖原氨单氧酶AMO），亚硝酸盐氧化还原酶，硝酸还原酶，亚硝酸盐还原酶NIR），外切聚磷酸酶PPX）和聚磷酸铵激酶PPK）。本文采用厌氧低溶解氧的废水处理工艺实现生物营养物去除，因为这项技术节省能源，氧气供应实现高的生物营养去除TiO2NPs的比表面积为106±8 m2/g。根据相关文献记载，为了产生100mg/L的纳米颗粒悬浮物，需在25摄氏度、250W和40KHz的条件下，将100mg的TiO2NP