2012高二生物5.1 DNA的粗提取与鉴定 课件(人教版选修1).pptVIP

【解析】　本题主要考查DNA分子的鉴定。A、B两试管形成对照，B试管中含DNA丝状物，A试管中不含，起对照作用，其他条件均完全相同。本实验强调反应条件是沸水浴加热5 min，加快颜色反应的速度，观察对比两试管的颜色时要等到冷却以后。 【易误警示】　(1)二苯胺要现配现用。刚配好的试剂为无色，存放一段时间后二苯胺自身会变成浅蓝色，影响鉴定效果。 (2)DNA还可用甲基绿染色剂直接滴在玻璃棒上的丝状物上进行鉴定，若丝状物被染成绿色，则证明该物质的主要成分是DNA。 跟踪训练　玻璃棒搅拌出的较纯净的DNA的颜色以及DNA遇二苯胺(沸水浴)染上的颜色分别是(　　) A．黄色、紫色　　　　　　　 B．白色、砖红色 C．白色、蓝色 D．蓝色、砖红色 解析：选C。玻璃棒搅拌出的纯净的DNA，没有经过染色，呈现出白色；在加热条件下，DNA与二苯胺反应呈蓝色。 课题1　DNA的粗提取与鉴定 课标领航 1．说出DNA的物理、化学性质。 2．概述DNA粗提取和鉴定的原理。 3．尝试对动物或植物组织的DNA进行粗提取。 【重点】　DNA粗提取和鉴定的原理。 【难点】　DNA粗提取的操作过程。 情境导引 DNA的提取是现代生物技术进行,中药鉴别的最关键步骤。总DNA的有,效提取要求材料中的DNA尽可能少的,降解。不同的研究目的对DNA的纯度,和量的要求不尽相同。 基础自主梳理 一、提取生物大分子的基本思路 1．基本思路 选用一定的______________方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。 2．提取DNA的方法 (1)概念：利用DNA与RNA、______和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。 物理或化学 蛋白质 (2)原理 ①分离 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的______溶液中溶解度不同，利用这一特点选择适当的_______就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。 ②提纯 a．DNA不溶于__________，但是某些蛋白质则可溶于其中。 b．蛋白酶能水解蛋白质，但是对_______没有影响。 NaCl 盐浓度 酒精溶液 DNA c．大多数蛋白质不能忍受60～80 ℃的高温而发生变性，而DNA在_____ 以上才会变性。 d．洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。 利用以上原理可以将DNA与蛋白质进一步分离。 ③鉴定 在沸水浴的条件下，DNA被________染成蓝色。 80 ℃ 二苯胺 思考感悟? 1．在什么浓度下，DNA的溶解度最小？DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的？ 【提示】　DNA在物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低；当NaCl溶液物质的量浓度低于0.14 mol/L时，DNA的溶解度随NaCl溶液物质的量浓度增加而逐渐降低；当NaCl溶液物质的量浓度高于0.14 mol/L时，DNA的溶解度随NaCl溶液物质的量浓度增加而逐渐升高。 二、实验设计 1．实验材料的选取 选用DNA含量相对_____的生物组织。 2．破碎细胞，获取含DNA的滤液 (1)动物细胞的破碎——以鸡血为例 在鸡血细胞液中加入一定量的________，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。 (2)植物细胞的破碎——以洋葱为例 先将洋葱切碎，然后加入一定的_____________，进行充分搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。 较高 蒸馏水 洗涤剂和食盐 3．去除滤液中的杂质 (1)方案一：通过控制_________的浓度去除杂质. (2)方案二：直接向滤液中加入嫩肉粉，反应10～15 min，嫩肉粉中的____________能够分解蛋白质。 (3)方案三：将滤液放在60～75 ℃的恒温水浴箱中保温10～15 min，注意严格控制温度范围，使_________沉淀析出而DNA分子还未变性，可以将DNA与蛋白质分离。 NaCl溶液 木瓜蛋白酶 蛋白质 4．DNA的进一步提纯 利用DNA不溶于冷却的酒精溶液这一原理，可从滤液中析出较纯净的DNA，此时DNA的状态为_________________。 5．DNA的鉴定 将呈_________________溶解于5 mL物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中，再加入4 mL的二苯胺试剂，____________加热5 min，冷却后观察溶液的颜色。注意要同时设置______实验。 白色丝状物 丝状物的DNA 沸水浴 对照 思考感悟? 2．为什么选用鸡血作实验材料？用哺乳动物的血作实验材料可以吗？ 【提示】　鸡血经济且易制得，鸡血红细胞、白细胞都具有细胞核，含大量DNA。哺乳动物的红细胞没有细胞核，DNA含量较低，因而不宜作实验材料。 三、操作提示 1．以血液为实验材料时，每100 mL血液中需要加入3 g__