怎样鉴别异性淋巴细胞新.pptVIP

怎样鉴别异型淋巴细胞 检验科：戴君洁 主要内容 物品准备 标本处理 涂片染色 显微镜观察 报告结果 一、物品准备 准备干净的玻片、推片 瑞氏染液、 待检EDTA抗凝全血 计时器 显微镜 计数器 二、样本处理 血涂片的制备： 1、制作血涂片的载玻片要求清洁、干燥、中性、无油腻； 2、距载玻片一端约1cm处滴EDTA抗凝全血30ul； 3、将推片放置于血滴的前端，紧挨血滴，使其顺推片边缘散开； 4、调整好推片与载玻片的夹角，使其约呈30度角，均匀向前推片。 影响涂片厚薄的因素有：血滴大小、推片与载玻片间的夹角，推片速度、血细胞比容。 制备涂片时，血滴越大、角度越大、推片速度越快，血膜越厚，反之越薄。血细胞比容增高、血液粘度较高时，应采用小血滴、小角度、慢推，可得满意结果；血细胞比容减低、血液较稀时，应采用大血滴、大角度、快推。 血涂片的好坏直接影响到细胞的鉴别。 一张良好的血涂片，要求厚薄适宜、头体尾明显、细胞分布均匀、血膜边缘整齐、两端和两边留有一定空隙。 三、涂片染色 1、滴入瑞氏染液I液数滴盖满标本，30秒； 2、再加入瑞氏染液II液与I液比例为1:1，染1—3分钟； 3、用流水冲洗涂片。 注意事项： 1、血涂片干透后火焰固定，否则细胞在染色过程中容易脱落。 2、冲洗时应以流水冲洗，不能先倒掉染液，以防燃料沉着在血涂片上。冲洗时间不能过久，以防脱色。如血涂片上有燃料颗粒沉积，可滴加甲醇，然后立即用流水冲洗。 3、染色过淡可以复染，复染时应先加缓冲液‘然后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。 4、染色的深浅与血涂片中细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度、PH值密切相关，可根据情况适当纠正。 四、显微镜观察 由于各种白细胞体积大小不等，在血涂片中分布很不均匀，一般体积较小的淋巴细胞在头、体部分布较多，而尾部和两侧以中性粒细胞核单核细胞较多，异常大的细胞常在片尾末端出现。一般认为细胞分布在片头至片尾的3/4区域比较均匀，因此分类时最好选择在体尾交界处，且必须按一定方式有规律地移动视野。 需在油镜下观察。 先调粗螺旋找到视野，再调动细螺旋慢慢找到较为清晰的视野。 在病毒或过敏原等因素刺激下，外周血淋巴细胞增生并发生异常形态变化，称异型淋巴细胞或“Downey”细胞。已知此种细胞属T淋巴细胞，其形态的变异是因增生亢进，甚至发生母细胞化的结果。根据细胞形态可分为三型。 2 I型 空泡型 III型 幼稚型 II型 不规则型 分型 细胞中等大小，细胞 多呈圆形或部分不规则 形或阿米巴型，胞质嗜 碱性强，呈深蓝色，含 有大小不等的空泡或呈 泡沫状，无颗粒或有少 数颗粒，胞核偏位，呈 椭圆形，肾形或分叶形， 染色质粗糙，呈粗网状 或成堆排列。 I型（泡沫型或浆细胞型） 细胞胞体较I型大， 形态不规则，胞质量 多，呈浅灰蓝色，但 靠胞膜边缘处较深染 且不整齐，无空泡， 可有少数天青胺蓝颗 粒，胞核呈圆形、椭 圆型或不规则形，染 色质较I型细致，亦呈 网状。 Ⅱ型（不规则型或单核细胞样型） 细胞直径 15um～18um，形态不规则，胞质呈蓝色，可有分布较均匀的小空泡，一般无颗粒，胞核圆形或卵圆形，可见核仁1个～2个，染色质细致、均匀，呈网状排列，无浓集现象。 Ⅲ型（幼稚型或幼淋巴细胞样型） 异型淋巴细胞除I、II、III型三个类型外，有时也可见到少数组织细胞样的难以归类的异型淋巴细胞。 异型淋巴细胞 异型淋巴细胞增多主要见于传染性单核细胞增多症、病毒性肝炎、流行性出血热、湿疹等病毒性疾病和过敏性疾病。正常人血片中可偶见此种细胞。一般病毒感染异型淋巴细胞 5%，而传染性单核细胞增多症时异型淋巴细胞常10%，因此二者可依据异性淋巴细胞的多少来鉴别诊断。 五、报告结果 计数1000个白细胞中异型淋巴细胞数为N; （1）未找到异型淋巴细胞； （2）计算异型淋巴细胞占白细胞的百分比。