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环境因子对莱氏野村菌cq菌株生长发育的影响 涂 增，翟 逸，万永继 （西南大学蚕学与生物技术学院，农业部蚕桑学重点实验室，重庆 400716 ） E-mail: tutu88@ 摘 要: 本文研究了环境因子对莱氏野村菌（Nomuraea rileyi ）cq菌株的生长、产孢与孢子 萌发的影响。温度对菌株的生长、产孢和孢子萌发有相同的效应，低温23℃是最适温度， 32℃以上明显抑制该菌的生长、产孢和孢子萌发；最适宜生长、产孢和孢子萌发的pH范围 为6.2~7.0 ； 24h光照有利于产孢，而24h黑暗有利于菌落生长；紫外线（40W ，45cm ）照 射2min ，96h该菌株孢子发芽率较对照降低16% ，8min ，96h孢子发芽率仅为7%。 关键词: 莱氏野村菌，环境因子，生长，产孢，孢子萌发 引言 莱氏野村菌属（Nomuraea ）包括至少五种病原真菌[1] ，分别为 N . anemonoides ，N . cylindrosporae, 莱氏野村菌（N .rileyi ）, N .viridula , N. cf. viridula WH000702-0 ，其中莱氏野 村菌[Nomuraea.rileyi （Farlow ）Samson]可以侵染多种鳞翅目害虫，特别是夜蛾科的棉铃虫、 烟青虫、甜菜夜蛾、粉纹夜蛾等并引起病害的大流行[2] 。国外已对此菌研究利用多年，较多 的集中于菌株资源的调查与开发，病原生物学及流行学，菌株致病性及与杀虫剂相容性研究 [2,3,4]等，并成功应用于大豆田夜蛾科害虫美洲棉铃虫 （Heliothis zea ）、大豆夜蛾 （Pseudoplusia [5] 。该菌引起害虫流行病的特性决定 includens ）和三叶草夜蛾（Plathypena scabra ）的防治 [2] 了其在鳞翅目夜蛾科害虫生物防治中具有重要地位 。 国内该菌研究报道较少，主要研究寄主范围、致病机理与致病性和营养条件及杀虫剂对 生长与产孢的影响[6,7] 。莱氏野村菌 cq 菌株是作者等从重庆地区蚕体中分离鉴定的，本文报 道了环境因子对该菌株生长、产孢和孢子萌发的影响。 1 材料与方法 1.1 材 料 1.1.1 菌株来源 ：莱氏野村菌cq菌株（Chongqing 031021 ）于2004年10月21分离自罹病蚕体， 菌种保存在西南大学蚕学与生物技术学院家蚕病理研究室。 1.1.2 菌悬液制备 ：用0.05%的吐温-80无菌水洗脱培养15天的斜面，配成一定浓度的菌悬液。 1.2 方 法 1.2.1 培养条件对菌株分生孢子萌发影响 分生孢子温热致死温度测定 调整菌悬液浓度，使其在16x10显微镜下为每个视野30~50个孢子,然后将孢子悬浮液装 入 1.5cmx10cm灭菌试管中，每管5mL，分别置于不同温度的恒温水浴锅中处理10min，设6 个温度(42C、44C 、47C 、50C、52C、54C)，处理过程中不时缓慢缓缓摇匀试管。对照 不处理，置于室温。将豆芽培养基融化后倒入直径60mm培养皿中，接种各处理菌悬液，用 无菌刮刀涂匀,23C,光照培养,每天观察孢子萌发情况, 第3天计算孢子发芽率。 孢子萌发情况用显微镜在10x40下观察，观察孢子数不少于300个。孢子发芽率 （% ）＝ （视野中萌发孢子个数/视野中孢子个数）x100% 。 温湿度对分生孢子萌发的影响 将菌悬液均匀涂布到豆芽汁培养基平板，置于不同温度条件（23C、26C、29C、32C ） 和不同相对湿度（75%、85%、95% ）下培养，每12h观察一次，计算孢子发芽率。 湿度控制方法：将两个同样大小的培养皿底扣在一起，底下的皿里放置纱布，用不同盐 溶液浸没，涂有孢子悬液的培养皿置于纱布上，封口膜封住扣在一起培养皿之间的缝隙 。不 同盐溶液保持