水溶性荧光标记壳聚糖的制备及性能的研究与应用初探.pdf

摘要 荧光高聚物是把小分子荧光化合物引入聚合物的侧链、链端或通过荧光功能 单体聚合制备的功能高分子。自从六十年代以来，荧光高分子合成及应用的研究 已成为当今的热点。壳聚糖是天然多糖中唯一的碱性多糖，具有良好的生物相容 性和生物降解性能。壳聚糖链中的伯胺基团很容易和生物分子发生反应，本文合 成了N,N,N-三甲基-O-羧甲基-N ′-芘丁酰肼（PyHy-CMTMC ），并对其荧光性能、 猝灭行为以及其对DNA 的识别作用效果进行了研究。 在合成N,N,N-三甲基壳聚糖的基础上，对其进行 O-羧甲基化改性，再引入 芘荧光基团，得到N,N,N-三甲基-O 羧甲基-N ′-芘丁酰肼。采用FTIR ，固体紫外， 电子荧光显微镜和1H MNR 等表征手段证实产物结构符合预期的设计目的，合成 了水溶性的壳聚糖基荧光衍生物。 N,N,N- 三甲基-O 羧甲基-N ′- 芘丁酰肼具有溶度效应，其自聚溶度约为 1mg/mL，当超过1mg/mLPyHy-CMTMC 开始自聚，产生荧光自猝灭；由于改性 后的壳聚糖具有特殊的结构，pH 值会影响 PyHy-CMTMC 的荧光性能； PyHy-CMTMC 在N- 甲基吡咯烷酮、N, N-二甲基甲酰胺、乙醇四氢呋喃和丙酮 与水的混合溶剂（v ：v 水=1 ：5 ）中都能发射荧光，且都具有荧光增敏作用； PyHy-CMTMC 在作为乙醇浓度探针方面具有一定的潜力。 考察了一些常见猝灭剂对PyHy-CMTMC 的水溶液荧光的影响，发现胺类物 质尿素、三甲胺和硝基盐NaNO3 、NH4NO3 不能对其产生荧光猝灭；卤素离子能 - - - 对 PyHy-CMTMC 产生荧光猝灭，猝灭作用效果为 I Br Cl ；在所考察的金属 离子中Hg+ 、Cu2+ 、Fe3+能对PyHy-CMTMC 产生比较强的荧光猝没。具体研究 了 Cu2+ 的浓度对 PyHy-CMTMC 水溶液的荧光猝灭作用，发现 Cu2+ 对 PyHy-CMTMC 发生的是静态猝灭，且形成的是非1：1 的配合物。 通过对芘丁酸，芘丁酸甲酯，芘丁酰肼与鲱鱼精 DNA 荧光猝灭研究发现， 具有酰胺键的芘丁酰肼对鲱鱼精DNA 具有较好的识别效果。标记有芘丁酰肼的 PyHy-CMTMC 对鲱鱼精DNA 同样具有一定的识别作用。PyHy-CMTMC 对鲱鱼 精DNA 的识别作用并不受NaCl 的影响，它们之间的是以壳聚糖的嵌入和酰胺 键共同作用的结果。 1 关键词：壳聚糖；芘丁酰肼；荧光性能；DNA 识别 2 Abstract Fluoresence polymer is introduce the small molecule fluorescent to polymer′s side chain,chain-side or prepare through the fluorescent functional monomer polymerization of functional polymer. Since 1960s,the researchof fluorescence polymers synthesis and application is attractive.Chitosan is the only alkaline in the nature with advantages of bilcompatibility and biodegradability. It is easy for primary amine group in chitosan to