第七章遗传.pptVIP

第三节 基因重组杂交育种 一、原核微生物的基因重组转化、转导、接合、原生质体融合 二、真核微生物的基因重组有性杂交、准性杂交 基 因 重 组 凡把两个不同性状个体内的遗传基因转移在一起重新组合，形成新遗传型个体的方式，称基因重组 一、原核微生物的基因重组 （一）转化（Transformation) （二）转导(Transduction) （三）接合(Conjugation) （四）原生质体融合 （ 一）转化(Transformation) 1、定义：受体菌直接吸收供体菌的 DNA 片段而获得后者部分遗传性状的现象，称为转化或转化作用。 2、转化过程 以革兰氏阳性的肺炎双球菌为材料，转化过程大体是： A、双链DNA片段与感受态受体菌的细胞表面特定位点结合。 B、在位点上的DNA发生酶促分解，形成平均分子量为（4~5) x 106D的DNA片段。 C、 DNA双链中的一条单链逐步降解，同时，另一条单链逐步进入细胞。 D、 转化DNA单链与受体菌染色体组上的同源区段配对，接着受体染色体组的相应单链片段被切除，并被外来的单链DNA所交换和取代，于是形成了杂种DNA区段。 E、受体菌染色体组进行复制，杂合区段分离成两个，其中之一类似供体菌，另一类似受体菌。当细胞分裂后，此染色体分离形成了一个转化子。 转化全过程 转化的分子机理 （二）转导(Transduction) 通过缺陷噬菌体的媒介，把供体细胞的DNA片段携带到受体细胞中，通过交换和整合，使后者获得前者部分遗传性状的现象，称转导。 转导又分为: 普遍性转导 局限性转导 1、普遍性转导(Generalized transduction) 噬菌体可误包供体菌中的任何基因，并使受体菌实现各种性状的转导，称为普遍性转导。 分两种： 1）完全转导 2）流产转导 1）完全普遍转导(Complete transduction) 在鼠伤寒沙门氏菌的完全转导实验中转导媒介P22噬菌体在野生型菌株供体菌内发育时，极少数（10-6~10-8）噬菌体将与噬菌体头部DNA芯子相仿的供体菌DNA片段误包入其中，因此形成了完全不含噬菌体本身DNA的假噬菌体，当假噬菌体将外源DNA片段导入营养缺陷型菌株受体菌内时，由于导入的供体DNA片段可与受体染色体组上的同源区段配对，再通过双交换而重组到受体菌染色体上，形成了遗传性稳定的转导子。 2）流产普遍转导(Abortive transduction) 由于转导噬菌体所引入的野生型基因并没有整合到受体菌的染色体上，因而不能复制，当受体菌分裂为两个时，只有一个细菌获得了这一基因，而另一个细菌未获得，从而还是营养缺陷型细菌。 表现为基本培养基上除了正常大小的菌落外，还有一些微小菌落。 流产转导 2、局限转导(Restricted transduction) 局限转导： 通过某些部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因转移到受体菌中的转导现象。 据转导频率的高低分为低频转导和高频转导。 高频转导 （三）接合(Conjugation) 通过供体菌和受体菌完整细胞间的直接接触而传递大段DNA的过程，称为接合。 在细菌中，接合现象研究得最清楚的是大肠杆菌。发现大肠杆菌有性别分化， 决定它们性别的因子称为F因子（致育因子 ）。 F 因 子(Fertility factor) 一种在染色体外的小型独立的环状DNA，一般呈超螺旋状，具有自主的与染色体进行同步复制和转移到其他细胞中去的能力，此外，其中还带有一些对其生命活动关系较小的基因。 F因子的分子量为5 x 107Da 。 接合过程 F因子转移和复制的细节 （四）原生质体融合(Cytoplasmic fusion) 通过人为方法，使遗传性状不同的两个细胞的原生质体发生融合，并发生重组子的过程，称为原生质体融合或细胞融合。 二、真核微生物的基因重组 1、有性杂交 2、准性杂交 1、有性杂交(Sexual Hybridization) 有性杂交，一般指性细胞间的接合和随之发生的染色体重组，并产生新遗传型后代的一种育种技术。 2、准性杂交（Parasexual hybridization) 准性生殖是一种类似于有性生殖, 但更为原始的一种生殖方式，它可使同种