比色法与紫外可见光光度法.pptVIP

比色法与紫外可见光光度法 比色 * 光分析法 光谱法 吸收光谱法 原子吸收光谱法 紫外可见分光光度法（比色计） X射线吸收光谱法 红外吸收光谱法(红外碳硫) 核磁共振波谱法 发射关普法 原子发射光谱法（光谱） 原子荧光光谱法 化学发光法 磷光广度法 散射光谱法 拉曼散射光谱法 非光谱法 折射法 旋光法 比浊法 衍射法 偏振法 干涉法 * 基本原理 溶液颜色与光吸收的关系 波长 透射颜色 互补色 400~435 青紫 淡黄~绿 435~480 蓝 黄 480~490 淡绿~蓝 橙 490~500 淡蓝~绿 红 500~560 绿 紫 560~580 淡黄~绿 青紫 580~595 黄 蓝 595~610 橙 淡绿~蓝 610~750 红 淡蓝~绿 * 吸收定律 朗伯-比尔定律 I 1 A=lg----=lg----=kbc I0 T 式中k为比例常数 I0入射光强度 b为液层厚度 c为溶液浓度 T为透光率 I为透过光强度 A为溶液吸光度 吸光系数和摩尔吸光系数 摩尔吸光系数：如果液层厚度单位为cm，溶液浓度的单位为mol/L时的吸光系数，单位L/mol。cm。 ε越大，该物质的颜色越深，灵敏度越高。 * 目视比色法 定义：用眼睛观察，比较溶液颜色深浅来确定物质含量的分析方法。 原理：将标准溶液与被测溶液在同样的条件下，当溶液层的厚度相同，颜色深度一样时，两者浓度相等。 常用方法：标准系列法。 观测方法：从比色管口垂直向下观测。 * 分光光度法 原理：用滤光片、棱镜或光栅（光谱）来分光，得到单色光，让单色光照射有色溶液，没被吸收的透射光投射到光电池或关电倍增管上，产生光电流，其光电流大小与透射光强度成正比，从而求出被测物的含量。 光度计分类： 1、单光束分光光度计 * * 分光度法 2、双光束分光度计。 * 分光光度法 入射波长 入射狭缝 参比溶液 吸光度及读数范围0.2-0.7 显色剂 显色反应：酸度、浓度、温度、时间、溶剂、干扰等。 溶剂 * 分光光度法应用 定性分析： 物质纯度鉴定 未知物鉴定：图谱 分子结构中官能团的推测：吸收峰 同分异构体的判别 定量分析： 单组分分析：工作曲线 多组分分析：测定吸收系数法，方程组。 差示分光光度法：用已知浓度的标准溶液作参比调节100%（A=0），然后将被测物质推入光路中。 * 分光光度法应用 无机元素分光光度法 有机物质紫外分光光度法 国家标准中有机物的分光光度法 食品分析 *