722秦病毒感染的检测方法与防治原则要点.ppt

第22章病毒感染的检测方法与防治原则 病毒感染的诊断 标本采集与送检： 采样时间：尽可能在发病早期，标本病毒含量多，因疾病后期， 机体产生免疫力或采取抗病毒治疗 标本选择：从病毒侵入部位或病毒感染的靶器官取材。血清学诊 断的标本，取急性期和恢复期双份血清，抗体效价增 高4倍或以上才有诊断价值 尽快送检：大多数病毒抵抗力弱，室温中很容易灭活，宜立即接 种，否则必须冷藏。远距离运送的标本最好用有干冰 的密闭容器 病毒感染的实验室检查方法 直接病毒诊断 病毒的分离培养与鉴定 病毒感染的血清学诊断 直接病毒诊断： 细胞病理学方法:光镜下检查病变组织或脱落细胞中的特异性病毒 包涵体，DNA病毒在核内装配产生核内包涵体， RNA病毒在胞浆装配产生胞浆包涵体 电子显微镜法:负染法（重金属染液，电子光束通过低电子密度的病毒颗粒但不能通过金属背景，病毒颗粒明亮清晰，负反差）、超薄切片法、immune electron microscope（抗体处理病毒颗粒形成病毒抗体复合物凝聚成团，高速离心负染后观察） 病毒抗原检测:胞内病毒抗原的检测：免疫荧光技术 、 免疫酶技术 胞外（游离）病毒抗原的检测：ELISA 病毒核酸检测：核酸杂交技术 斑点分子杂交法、Southern印迹法、 原位分子杂交法、Northern印迹法 聚合酶链反应技术（PCR） （1）标本处理：组织、细胞：粗提将沉渣、细菌、真菌等去除，释 放病毒，有的还需要提纯浓缩体液：脑脊液、胸腔液、水泡液、尿液等直接接种培 养管拭子：咽、眼、鼻拭子直接放入含有抗生素的培养管 常用的细胞培养 Diagnosis Strategy for Viral Infection ELISA for HIV antibody 人工主动免疫－病毒疫苗 减毒活疫苗（attenuated live vaccine） 灭活疫苗（inactivated vaccine） 亚单位疫苗（subunit vaccine） 基因工程疫苗（gene engineered vaccine） 基因工程亚单位疫苗（gene engineered subunit vaccine） 基因工程载体疫苗（gene engineered vectored vaccine） 基因缺失活疫苗（gene deleted live vaccine） 核酸疫苗（nucleic acid vaccine）。 合成肽疫苗（synthetic peptide vaccine） 抗独特型抗体疫苗（anti-idiotype vaccine） 活疫苗（live vaccine） 减毒活疫苗 基于基因工程技术的新型活疫苗 遗传重组活疫苗 基因缺失活疫苗 载体活疫苗 减毒活疫苗(attenuated live vaccine) 自然或人工选择法（如Ts株） 所筛选的对人低毒或无毒的变异株，如脊灰、流感、麻疹的减毒株 优点：模拟自然感染，免疫效果好，局部IgA。 理论上的缺点，实际工作中少见 变异株可能回复到有毒力的野生株 如果机体免疫缺陷，减毒株仍可能引起感染或并发症 可能激活机体内其它病毒的感染 减毒活苗可能引起持续感染 成功的范例：1961年我国应用脊灰疫苗，脊灰发病率大幅度下降。1980年天花病毒灭绝