实验叶绿体色素的测定和解决方案.pptVIP

实验五 叶绿素的提取、理化性质和含量测定 1. 实验目的 提取叶绿素 叶绿素的物理性质 叶绿素的化学性质 叶绿素含量的测定 2. 实验原理 2.1 用含水的有机溶剂提取叶绿素 2.2 叶绿素的物理性质 吸收光谱 荧光现象 2.3 叶绿素的化学性质 取代反应 皂化反应 2.1 用含水的有机溶剂提取叶绿体色素 叶绿素分子含有一个卟啉环的“头部”和一个叶绿醇的“尾巴” 亲水的“头部”：镁原子居于卟啉环的中央，带正电性，与其相联的氮原子则偏向于带负电性，因而卟啉具有极性，是亲水的，可以与蛋白质结合 亲脂的“尾巴”：叶醇是由四个异戊二烯单位组成的双萜，是一个亲脂的脂肪链，它决定了叶绿素的脂溶性 2.2 叶绿素的物理性质 1) 吸收光谱 2) 荧光现象 3) 含量测定 1) 叶绿素的吸收光谱 3) 含量测定 叶绿素a、b在红光区的最大吸收峰分别位于663 nm 和645 nm； 叶绿素a、b在652 nm处有相同的比吸收系数（均为34.5），测OD652求出叶绿素a、b总量。 故叶绿素浓度 C＝OD652 / 34.5 ( mg/ml ) 叶绿素的含量（mg/g）= [叶绿素的浓度×提取液体积×稀释倍数]/样品鲜重 Chl: 强吸收区: 640-700nm(红)