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活性益生菌类及其加工技术 本单元主要内容 人体的肠道菌群与人体健康 益生菌的概念、种类、微生态机体调节功能; 双歧杆菌和乳酸杆菌等益生菌的分离、纯化、鉴定和发酵剂制备工艺技术; 双歧杆菌和乳酸杆菌的特性、菌种扩大培养技术以及相应功能性食品的生产工艺 。 人体的肠道菌群与健康 人体结肠中细菌:至少有50个属400多种,数量 在100亿以上。 肠道菌分为三类: 致病菌 机会性病原菌 益生菌 致病菌 这些菌既致病又产毒,是腹泻、便秘、肠道感染、肝损伤、癌症和脑炎的罪魁祸首 如:假产气菌 变形杆菌 葡萄球菌 梭状芽孢杆菌等 机会性病原菌 这些菌在人体抵抗能力弱的时候,可致病又产毒,还会产生致癌因子等,但在人体健康时又能抑制外来菌的生长,刺激人体免疫功能的产生,以及合成某些维生素 如:大肠杆菌 肠球菌 链球菌等 益生菌 这些菌能抑制外来有害菌的生长,调节人体免疫功能,帮助结肠中残余食物的消化吸收,以及合成某些维生素 如: 双歧杆菌 乳酸杆菌 一些真菌等 人体的肠道菌群与健康的关系 肠道中的致病菌、机会性病原菌、益生菌不仅在人体的健康和疾病方面有重要作用,而且与人体的营养、生理功能、药物功效、癌症、免疫反应、衰老等密切相关 。 当人体肠道菌群中益生菌占上风/优势时,人体处于健康的状态; 当致病菌、机会性病原菌占上风/优势时,人体处于疾病或不健康的状态。 双歧杆菌 有9种,最常见的有: 两歧双歧杆菌 婴儿双歧杆菌 长双歧杆菌 短双歧杆菌 青春双歧杆菌 双歧杆菌特性 1.属革兰氏阳性专性厌氧菌 2.生长最佳条件 36~38℃。对热耐受性差。生长初期最适pH值为6.5~7.0,但总体抗酸性弱。 3.能发酵葡萄糖、果糖、乳糖和半乳糖 4.分解葡萄糖时代谢产物为乙酸和乳酸 5.蛋白分解力微弱 6.细胞形状多样 7.对营养要求复杂 常见双歧杆菌的特征 双歧杆菌的生理功能 对肠道菌群的调节作用 免疫调节作用 降血脂作用 产生维生素等活性物质的作用 无菌状态下出生的婴儿 双歧杆菌培养基制备的原则 1.满足对营养和生长物质的要求 2.控制低氧化还原电位 3.在生长过程中pH的控制和缓冲容量 4.控制培养基中最终pH 双歧杆菌的最适培养基1 双歧杆菌的最适培养基2 培养基2中的溶液A、溶液B (1)溶液A: K2HOP4 25.0g、KH2PO4 25.0g、溶于250mL蒸馏水中。 (2)溶液B: MgSO4· 7H2O 10.0g、 FeSO4·7H2O 0.5g、MnSO4·?4H2O0.33g、NaCl 0.5g溶于225mL蒸馏水中。 双歧杆菌培养基制备 1. 肝提取物溶液制备:10.0g肝粉在170mL蒸馏水中于50~60℃浸提1h,煮沸10min后过滤。 2. 除L-半胱氨酸盐酸盐外的所有成分溶于蒸馏水中,调整pH7.2,于120℃灭菌10min,冷却至50℃,添加半胱氨酸盐酸盐于5%灭菌溶液中。 用于扩培的液体培养基 所有成分溶解完全后调pH7.5,121℃灭菌15min。 双歧杆菌菌种 用于生产的双歧杆菌有两类: 纯双歧杆菌菌种 含双歧杆菌的混合菌种 最常用的双歧杆菌菌种: 两歧双歧杆菌 有时也用长双歧杆菌。 最典型、应用最广泛的混合菌种: 双歧杆菌、嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌(即BAT,提高酸度和风味成分含量) 双歧杆菌菌种的提供和保存 双歧杆菌和混合菌种一般由高校和研究所提供,或从适合物质中提取分离。 菌种的保存常用冷冻法,如 液氮(-195.8℃)中冷冻作长期保存 -25~-40℃作短期保存 干冰(-78.8℃)运输 工作发酵剂的制备 混 纯双歧杆菌菌种→培养(42℃、4h) → 合 嗜酸乳杆菌种培养(42℃、24h )… → 菌(1:1:1) 嗜热链球菌种培养(42℃、7h) … → 种 ↓ 扩大培养(42℃、4h) ↓
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