第6章黄酮类化合物R1概论.ppt

习 题 1、黄酮类化合物结构类型有哪些？分类依据是什么？ 2、黄酮类化合物的主要鉴别反应？ 3、聚酰胺色谱法分离黄酮类化合物的原理是什么？常用洗脱剂、洗脱规律是什么？ 原理：酚羟基与碱成盐，溶于水；加酸后析出。 碱：常用饱和Ca(OH)2水溶液，石灰乳， 5%NaCO3溶液，稀NaOH水溶液等。 优点：可使含酚羟基化合物成盐溶解，另一方面可使含COOH的果胶、粘液质、蛋白质等杂质形成沉淀而除去。 第三节 提取与分离 2. 碱提酸沉法 第三节 提取与分离 2. 碱提酸沉法 注意：碱性不宜过强，以免破坏黄酮母核； 酸化时，酸性不宜过强，pH3~4即可，以免形成佯盐而溶解。 第三节 提取与分离 3. 离子交换 原理：酚羟基与碱成盐，溶于水；采用阴离子交换树脂交换，加酸后析出，用有机溶剂回流提取。 第三节 提取与分离 4. 炭粉吸附法（主要适用于苷类的精制） 二、分离 （一）各种色谱方法： 1）硅胶吸附色谱 按极性大小分离，主要分离极性小和中等极性的化合物。 可用CC（柱色谱），PTLC（制备薄层） 主要适于分离异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化（或乙酰化）的黄酮及黄酮醇类。少数情况下，在加水去活化后也可用于分离极性较大的化合物，如多羟基黄酮醇及其苷类等。 第三节 提取分离方法 2）聚酰胺色谱： 原理：聚酰胺分子中具有酰胺羰基，可与酚羟基形成氢键，主要依据与被分离物质成氢键能力不同进行分离。 吸附强度主要取决于： ① 黄酮类化合物分子中羟基的数目与位置以及溶剂； ② 黄酮类化合物酚羟基与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。 （形成氢键主要指酚羟基，糖部分不参与形成氢键） 第三节 提取与分离 其洗脱规律：（顺序先—后） (1) 苷元相同, 洗脱先后顺序一般是： 三糖苷双糖苷单糖苷苷元 (2) 母核上羟基增加，洗脱速度减慢 (3) 羟基数目相同,有缔合羟基无缔合羟基 (4) 不同类型黄酮的洗脱顺序： 异黄酮二氢黄酮（醇）查耳酮黄酮黄酮醇 （芳香核、共轭双键多者吸附力强） 第三节 提取与分离 第三节 提取与分离 习题：下列黄酮化合物， （1）用聚酰胺柱色谱，含水甲醇梯度洗脱， （2）用硅胶柱色谱分离，氯仿-甲醇梯度洗脱， 分别写出洗脱顺序 第三节 提取与分离 答案： 聚酰胺柱色谱洗脱顺序：由先到后 D，E，C，B，A 2. 用硅胶柱色谱洗脱顺序：由先到后 A，B，C，D，E 机理： 分离游离黄酮（苷元） ——靠吸附作用。吸附程度取决于游离酚羟基数目，苷元的羟基数越多, 越难洗脱。 分离黄酮苷（苷） ——分子筛起主导作用。在洗脱时，黄酮苷类按分子量由大到小的顺序流出柱体。 常用型号： Sephadex-G（适用于水溶性成分分离） Sephadex-LH20 （可用于亲脂性成分分离 ） 3）葡聚糖凝胶色谱 第三节 提取与分离 例：下列化合物，用凝胶柱色谱，含水甲醇洗脱，写出出柱顺序。 第三节 提取与分离 1） 2） 先后顺序：A B C 先后顺序：C A B 应用：分离酸性强弱不同的黄酮苷元 酸性比较：7,4 ’-OH 7-或4’-OH 一般OH 5-OH 溶于 NaHCO3 Na2CO3 不同浓度的NaOH 样品 乙醚 乙醚液 依次 萃取 5%NaHCO35%Na2CO3 0.2%NaOH4%NaOH 分别 酸化 各部分黄酮 （二）梯度pH萃取法 第三节 提取与分离 醋酸铅沉淀法： 邻二酚羟基黄酮＋醋酸铅 沉淀 不具有邻二酚羟基＋碱式醋酸铅 沉淀 （三）利用分子中的特定基团 第三节 提取与分离 练习题：从某植物中分离出四种化合物，其结构如下 试比较四种化合物的酸性， 极性大小 比较它们的Rf值大小顺序： 1）硅胶TLC 2）聚酰胺TLC A R1=R2=H B R1=H, R2=Rha C R1=Glc, R2=H D R1=Glc, R2=Rha 酸性 ACBD 极性 DCBA Rf ：ABCD DBCA 第三节 提取与分离 本 章 内 容 第一节 黄酮类化合物的结构与分类 第二节 黄酮类化合物的理化性质 第三节 黄酮类化合物的提取与分离 第四节 黄酮类化合物的鉴定