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基因工程药物 何谓基因工程药物？ 基因工程药物是指采用基因工程技术研制的，能预防和治疗某种疾病但含量极微而难以用传统方法制取的特殊药物。 基因工程药物包括哪些？ 基因工程药物的发展概况 20 世纪 70 年代，随着 DNA重组技术的成熟，诞生了基因工程药物，高产值、 高效率的基因药物给医药产业带来了一场革命，推动了整个医药产业的发展，医药产业进入了新的历史时期。 基因药物经历了三个阶段： 第一阶段是把药用蛋白基因导入到大肠杆菌等细菌中，通过大肠杆菌等表达药用蛋白，但这类药物往往有缺陷，人类的基因在低等生物的细菌中往往不表达或表达的蛋白没有生物活性。 第二阶段是人们用哺乳动物的细胞代替细菌，生产第二代基因工程药物。但由于哺乳动物细胞培养条件相对苛刻，生产的药物成本居高不下。 第一、 二代基因药物的研制和生产已经成熟。 从第一个反义核酸药物 Vitrovene 于 1998 年和 1999 相继在美国和欧洲上市以来，发展迅速。 第三阶段是到了 80 年代中期，随着基因重组和基因转移技术的不断发展和完善，科学家可以将人们所需要的药用蛋白基因导入到哺乳动物体内，使目的基因在哺乳动物身上表达，从而获得药用蛋白。携带外源基因并能稳定遗传的这种动物，我们称之为转基因动物。由于从哺乳动物乳汁中获取的基因药物产量高、 易提纯，因此利用乳腺分泌出的乳汁生产药物的转基因动物称为 “动物乳腺生物反应器”。 90 年代中后期，国际上用转基因牛、 羊和猪等家畜生产贵重药用蛋白的成功实例已有几十种，一些由转基因动物乳汁中分离的药物正用于临床试验，但还没有一例药品成功上市。 重组蛋白质类药物 细胞因子药物：干扰素、集落因子、白细胞介素、肿瘤坏死因子、趋化因子、生长因子、凝血因子 蛋白质类激素药物：生长激素、胰岛素、胰岛素样生长因子、促卵泡素、甲状旁腺素、降钙素、胰高血糖素、促黄体生成素、甲状腺刺激素和心钠素等。 溶血栓药物：组织型纤溶酶激活剂、尿激酶型纤溶原激活物、蝙蝠唾液纤溶酶原激活剂、链激酶和葡激酶等。 治疗用酶：超氧化物歧化酶、羧肽酶、尿酸氧化酶、葡糖脑苷脂酶、脱氧核糖核酸酶和胸苷激酶等。 可溶性受体和黏附分子：可溶性补体受体Ⅰ型 其他：血红蛋白、白蛋白等。 核酸类药物 核酸类药物主要是在核酸水平(DNA和RNA)上发挥作用，它通过纠正突变的基因并使之重新获得适当的功能来治疗或预防疾病。 特点是：能将基因表达的产物的作用局限于病变组织周围，从而使治疗更具针对性；只要转化细胞不被清除，转化的基因不被抑制，基因表达的产物就可以持续发挥作用。 基因工程药物的特点 从根本上解决了某些药物的生物原料 适应证不断延伸 技术含量高 加速疑难病症新药物的开发 研制基因工程药物的技术路线 基本技术路线1： 获得具有预防和治疗作用的蛋白质的基因 ? 组入表达载体 ? 受体细胞高效表达 ? 动物试验 ? 临床试验 申报新药证书 如人干扰素基因 建立基因高效表达系统 微生物表达系统 基因工程大肠杆菌的构建技术 动物细胞表达系统 优点 缺点 优点 一是哺乳动物细胞能够表达人或哺乳动物的蛋白质 二是哺乳动物细胞可对表达的蛋白质进行正确折叠、组装和糖基化等加工,生产有生物活性的产品 缺点 用转基因动物细胞生产药物成本昂贵。 动物活体表达系统 转基因动物 动物活体表达系统 乳腺生物反应器 基本方法 将药用蛋白质基因连接到乳汁蛋白质基因的调节元件下游，然后将连接产物显微注射到哺乳动物受精卵或胚胎干细胞，当转基因胚胎长成个体后，在泌乳期药用蛋白质基因表达，从动物乳汁可获得基因工程药物。 优点 采用乳汁蛋白质基因的调节元件调控药物基因的表达, 具有组织特异性，基因表达限于乳腺组织； 表达产物不断随乳汁排出体外, 产量高； 与原核细胞表达系统比较，乳腺细胞具有蛋白质修饰功能，表达产物具有稳定的生物活性； 蛋白质提取、纯化简单。 在经济效益方面，应用转基因动物—乳腺生物反应器技术来制造基因药物也是一种可以获取巨额经济利润的新型产业。 存在问题 1)由于药物基因随机整合的位置效应会引起的表达不稳定性； 2)对乳汁中蛋白质基因表达的调控机制有待深入了解，尤其是时空特异性表达及激素诱导性表达等问题须进一步探索。 动物活体表达系统 动物血液生物反应器 动物膀胱生物反应器 动物血液生物反应器 外源基因在血液中表达的转基因动物叫血液生物反应器。大家畜的血液容量较大，利用动物血液生产某些蛋白质或多肽等药物己取得了一定进展。外源基因编码产物可直接从血清中分离出来，血细胞组分可通过裂解细胞获得。 动物膀胱生物反应器 外源基因在膀胱中表达的转基因动物生物反应器,叫动物膀胱生物反应器。膀胱尿乳头顶端表面可表达一组尿血小板溶素的膜蛋白，这种蛋白在膀