陈念《非水短肽合成》解析.doc

《 1.1.The significances of short peptide synthesis 1.2.The excellence and shortcomings of enzyme-catalyzed synthesis compared with other synthesis methods 2. The mechanisms of enzyme-catalyzed peptides synthensis in organic solvent 3.The influencing factors 3.1.Factors of the enzyme 3.1.1Preparation 3.1.2The pH and the ion strength of the buffer 3.2Carrier 3.2.1The methods of the enzyme-immobiliation 3.3Modification 3.3.1Modification of the enzyme 3.4The solvent system 3.4.1The characters of the solvent system 3.5The characters of the reactant and the offspring 3.5.1. The solubility and concentration of the reactants 3.5.2. The water content and activity 3.5.3.The hydrophobility of the protecting groups 3.6.Other factors 3.6.1.Temperature 3.6.2.Salts added into the reaction system 3.6.3 Polarity additives 4. Summary 4.1Key problems need to be solved in the peptide sythensis 5. Accessary tables 5.1.The collections of the examples about short peptide synthesis 5.2.LogP datas of some organic media 5.3.LogP datas of some enayme carrier 6.Postscripts 《蛋白水解酶催化短肽合成研究综述（第二版）》 华南农业大学生命科学学院2002届生物化学与分子生物学专业 （作者： 陈 念 指导老师：高 向 阳） 一．前 言 肽合成的意义 1.现代生物代谢研究发现：人类摄取蛋白质经消化道的多种酶水解后，并非完全以氨基酸的形式吸收，更多是以低肽形式直接吸收，而且二肽三肽的吸收比同一组成的氨基酸快。其中某些低肽不仅能提供人体生长发育所需的营养物质，且同时具有促进矿质吸收、提高肌体免疫力等重要的生理功能。 2.生物活性肽是一类多功能因子，它们涉及许多生理代谢和调节功能。日本利用生物活性肽以开发出许多功能性食品，取得了良好的经济和社会效益。 （二）相对其它方法酶法肽合成的优、缺点 1.(居乃虎[])酶反应通常是在水为介质的系统中进行的，但是，人们研究发现，在有机介质中酶反应也能进行。近来，核磁共振、X-射线衍射和傅立叶变换红外光谱的研究表明，在非水相中，酶分子结构中α-螺旋含量减少，β-折叠含量增加二级结构的有序性增加，因而，提高了酶的稳定性。目前，非水系统中的酶催化作用已广泛的用于药物、生物大分子、肽类、手性化合物化学中间体和非天然产物等的有机合成，引起人们的极大关注。 2有机介质中的酶促反应（尤其是合成只含几个氨基酸的小肽片段）较传统化学合成法有明显优势： a能催化水中不能进行的反应，可以使反应平衡由水解向肽合成方向逆转 b酶的立体专一性强，避免了化学法合成中产物的消旋问题 c较少用侧链保护基；可抑制由水等引起的副反应（例如水会使酶分子形成不规则结构、二硫键被破坏、Asp肽键水解、Asn和Gln残基脱酰胺、酰卤和酸酐水解）；且无微生物污染 d可提高疏水性底物（氨基酸及脂类衍生物）的溶解度，利于高浓度底物连续生物转化 e 酶源广泛，也可通过微生物发酵生产制备大量的酶 f固定化可以提高酶的稳定性 g酶不易溶于有机介质利于回收再利用；而且从低沸点溶剂中分离纯化产物也比水中容易 h 酶能合成或转化大量有机物，绝大多数有机化合