液相色谱培训下资料.ppt

3、基线漂移 故障原因 排除办法 3.1、 温度控制不稳 用柱温箱控制温度 3.2、 流动相不均匀 流动相充分混匀 3.3、 色谱柱未平衡 充分平衡色谱柱 3.4、 系统内有空气 排出或抽出空气 3.5、检测器灯能量不足 更换检测器灯 说明：在购入新的检测器灯前，可以先将灯 取出（带手套操作），用脱脂棉沾无水乙醇 擦净灯的表面，还能短时内使用。 4、峰形问题 4.1、前延峰： 故障原因 排除办法 4.1.1、色谱柱前端塌陷 处理或更换色谱柱 4.1.2、 柱温偏低 调节柱温 4.1.3、 样品溶剂不当 选择适合的溶剂 4.1.4、 样品过载 降低样品浓度 说明：在测定样品有关物质过程中，要更换 相同厂家和相同批号的色谱柱以确保分析结 果差异不大，含量无此要求。 4.、峰形问题 4.2、拖尾峰： 故障原因 排除办法 4.2.1、色谱柱前端堵塞 冲洗或更换色谱柱 4.2.2、流动相pH值不当 选择适合的pH值 4.2.3、样品中有干扰峰 选用更长的色谱柱 说明：冲洗时应反向低流速（0.1-0.3mL/min) 冲洗，同时还要注意色谱柱是否允许反向冲 洗（前后筛板孔径不一致时，会使填料流 失，导致色谱柱无法使用）。 4、峰形问题 4.3、分叉峰： 故障原因 排除办法 4.3.1、 色谱柱前端污染 冲洗或更换色谱柱 4.3.2、 色谱柱前端损坏 更换色谱柱 4.3.3、溶剂与流动相不溶 用流动相为溶剂 说明：一般样品都用流动相作为溶剂，也有 的标准没有用流动相做溶剂，这通常与样品 的溶解性有关。在此情况下，进样前要先进 空白，确定对系统测定的影响情况。 4、峰形问题 4.4、变形峰： 故障原因 排除办法 4.4.1、色谱柱前端污染 冲洗或更换色谱柱 4.4.2、 样品过载 降低样品浓度 说明：为了降低样品对色谱柱前端的污染， 特别是成分复杂的中药及污染性强的生物制 品时，我们通常会在色谱柱前安放一根保护 柱，这时要注意保护柱与色谱柱的填料一定 要相同，并及时更换保护柱柱芯。 4、峰形问题 4.5、额外峰： 故障原因 排除办法 4.5.1、前次进样有洗脱峰 增加运行时间 4.5.2、 流动相污染 重配流动相 4.5.3、样品溶剂选择不当 用流动相为溶剂 说明：在此情况下，我们不仅要增加系统运 行时间，还要注意清洗进样针并冲洗手动进 样阀。 5、维护保养问题 5.1、流动相配制： 5.1.1、选用色谱纯试剂，缓冲盐可用分析 纯，同时还要注意水的问题，尽量选用瓶装 或桶装纯水，车间自制纯化水一定要经过检 测合格才能使用。 5.1.2、混匀后要过滤，注意选用的滤膜种类 5.1.3、过滤后充分超声，一般在10分钟以上 5.1.4、注意观察流动相性状 5、维护保养问题 5.2、日常操作时的注意事项： 5.2.1、排气前一定要打开排气阀，避免损坏 柱子。 5.2.2、改变流速时幅度要小。 5.2.3、手动进样时动作要快，避免损伤进样 阀。 5.2.4、每天用完仪器后要冲洗系统，不要忘 记冲洗泵柱塞杆和进样阀。 5、维护保养问题 5.3、更换消耗性部件时的注意事项： 5.3.1、应定期更换溶剂滤头和排气阀筛板， 一般每使用一年换一次。 5.3.2、应定期同时更换泵的两个密封垫，一 般每使用半年换一次。 六、色谱柱 1、总述 2、种类 3、选择依据 4、使用方法 5、故障处理 1、总述 HPLC 系统中的输液泵、色谱柱、检测器是 关键部件，而核心部件只有色谱柱。 选择适合的色谱柱是我们能否顺利进行对样 品的分离及分析的关键。另一方面，正确使 用与维护色谱柱是我们能否顺利进行对样品 的分离及分析的重点。但是很遗憾，如此重 要的色谱柱同时也是整个HPLC 系统中最脆 弱的部分，所以有必要对色谱柱方面的内容 进行单独的探讨。 1、总述 常见的柱管材料为金属管，一般色谱柱长5 ～30cm常用的有10、15、20及25cm，内径为 4～5mm，常见的为4