2012春生理生化实验生理部分解析.ppt

生理生化实验技术 植物生理实验 何迎春 实验室规则： 1、认真预习实验。明确目的，掌握原理，列出步骤，提出问题。 2、认真操作，仔细观察，从实记录。 3、正确操作仪器，不乱开仪器。 4、注意安全和清洁卫生（包括值日）。 5、正确处理废物。 实验报告要求： 实验原理：简明扼要。 材料：用什么？ 方法：实际操作过程。 数据计算：原始数据，计算公式，结果。 讨论和分析：针对自己的结果进行。 实验报告在下一次实验时上交，但实验原始数据须经指导老师审核后才可离开。 实验评分标准： （一）课上： 50分 1、预习报告； 10分 2、认真实验，操作规范，实验结果符合要求；30分 3、不迟到，不早退，积极参与卫生清扫。 10分 实验评分标准： （二）课下：实验报告评分标准 50分 1、卷面清洁，字迹工整； 5分 2、语句通畅，简明扼要，逻辑性强，表达准确无概念错误； 5分 3、预习报告、实验原始记录、实验报告齐全； 10分 4、实验报告格式规范，重点突出； 10分 5、实验原始记录要如实认真记录实际操作、观察及测定结果； 10分 6、对实验结果的讨论要充分有据，论点要正确，与该实验无关的内容不要写入报告中； 10分 7、抄袭别人报告者。 0分 实验项目 实验一 植物组织水势的测定 实验二 叶绿素a、b含量的测定 实验三 植物呼吸强度的测定 实验四 生长素对根芽生长的不同影响 实验五 种子生活力的快速测定 实验六 植物抗逆性的鉴定 实验一 植物组织水势的测定 —小液流法 （一）实验目的 掌握植物组织水势的测定方法； 了解渗透系统中水势大小是水分移动方向的决定因素。 （二）实验原理 植物生活细胞是一个渗透系统，当将植物细胞或组织放入外界溶液中时，水分将以水势差为动力在两者间流动，最终达到动态平衡。 如果植物组织的水势小于外界溶液的水势，植物细胞吸水，使外界溶液浓度增大；反之，植物细胞失水，使外液浓度变小。若植物组织与外界溶液水势相同，将不改变外部溶液的浓度，此时外液的渗透势就等于植物组织的水势。 可以利用外界溶液的浓度不同其比重也不同的原理来确定与植物组织水势相同的外液，根据公式计算植物组织的水势。 （三）实验用品 1．植物材料 玉米或菠菜叶片 2．实验器材 吸水纸、容量管（或10ml量筒）、试管、 橡皮塞或软木塞、带盖青霉素小瓶、胶头细玻璃弯管（长滴管）、移液管、剪刀或打孔器、试管架、温度计和镊子。 3．实验试剂 lmol/L的蔗糖溶液、甲烯蓝粉末。 （四）实验步骤 1.外界溶液的配制与渗透作用 ①配制 0．1～0．8 mol/L 8个梯度的蔗糖溶液各10ml，注入8只试管中，并分别加上塞子后编号，作为对照组。 ②将8只青霉素小瓶编号，分别从对照组中相同编号的试管中取蔗糖溶液4ml注人各瓶，加上塞子作为实验组。 ③用剪刀或打孔器将玉米等植物的叶片剪成大小相同（约0．5cm）的小块，每瓶中投入40小块（约占1/4溶液体积），塞好塞子，放置 30 min。在此期间摇动小瓶数次。 ④用针尖挑取少许甲烯蓝粉末加入上述各青霉素瓶中，摇匀，此时溶液为浅蓝色。 （四）实验步骤 2．等渗溶液确定 ①用胶头细玻璃弯管从各小瓶中依次吸取少量的浅蓝色溶液，并用吸水纸吸掉管外壁上的溶液，然后将弯管伸入相同编号的对照组试管液体中部，缓慢放出溶液一滴，观察蓝色液滴的移动方向（见图）。 ②若有色液滴向上移动，表明组织失水，使蔗糖溶液浓度降低、比重减小；若有色液滴向下移动，表明组织吸水，使蔗糖溶液浓度升高、比重增大；如果有色液滴静止不动，则表明蔗糖溶液与植物组织水势相等，记录该蔗糖溶液的浓度。 （五）实验结果与计算 计算公式：фW =-RTiC 式中：фW为植物组织水势，以bar表示； i为解离系数，蔗糖是1； R为气体常数，0.083 L?bar/mol?K； T为绝对温度，K（即 273℃＋t，t为实验温度）； C为等渗溶液浓度，mol/L，可换算为质量摩尔浓度（mol/kg）。 （六）实验注意事项 1．叶片投入小瓶要快，小瓶及时加盖，防止叶内或小瓶中水分蒸发影响实验结果。 2．加入实验组的甲烯蓝粉末量不宜过多，以免影响溶液的比