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CA1500操作要点及经验介绍 周炳烨 概述 1.使用目的:全自动血凝分析仪CA-1500用于凝血、抗凝和纤溶系统功能的检测,为出血性和血栓性疾病的诊断与鉴别诊断、溶栓及抗凝治疗的监测与疗效观察提供有价值的指标。 2.检测原理:凝固法、发色底物法和免疫分析法。 概述 2.1.凝固法(散射比浊法加百分比终点法) 2.1.1散射比浊法CA-1500采用光学检测法,将血浆凝固过程中的浊度变化转变为散射光的变化后,通过光电二极管将光信号转变为电信号,处理器据此绘制出凝固曲线,用百分比检测法来确定凝固时间。 光源为发出660nm的卤素灯, 散射光信号为900直角方向 的散射光。 概述 2.1.2 百分比检测法:仪器把加入试剂后最初的散射光量设为0%,把反应结束后不再变化的散射光量设为100%。将与50%散射光量相对应的时间作为凝固终点报告,因为50%的部位单位时间内散射光量的变化最为显著,纤维蛋白单体的聚合速度最快。这种方法称为“百分比终点法”。 2.2 发色底物法——酶化学比色法:显色物质(对硝基联苯胺 PNA)+底物+酶检测物或酶活性相关检测物。CA-1500透射光源只有405nm、575nm和800nm三种滤光片。 概述 2.3 免疫分析法——免疫透射比浊法:抗体包被大小均一、直径15-60nm的乳胶颗粒,包被后的抗体与相应抗原结合后形成复合物体积增大,引起透射光的变化,由吸光度的变化推算出所检测物质的含量。光源同上。 3.检测参数 3.1 凝固法:PT\APTT\Fbg\TT,外源性凝血因子(2、5、7、10),内源性凝血因子(8、9、11、12)等。 3.2 发色底物法:ATIII、α2PI、Plg、PC等。 3.3 免疫分析法:D二聚体,P-FDP,vWF。 概述 4.检测性能 PT: CV≦2% APTT: CV≦2% Fbg: CV≦4% TT: CV≦10% PC: CV≦10% DD等其它: CV≦5% CA1500血凝仪日常操作流程 一、开机:按下机器右边的POWER按钮 开机后机器进行自检,当屏幕右上角显示“Ready:”时 可以进行试验 二、洗针:在主屏幕上选Rinse Probe 键,然后按Execute进 行洗针 三、检查消耗品: 1、准备反应杯:打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量,不足时,需及时添加。(一次性最多可放300个杯子) 2、准备试剂:按照仪器对试剂的要求,把每一项的试剂准备好,放到仪器内相应位置(主菜单下选择Set reagent),注意查看试剂的量和有效期。例如:CleanⅠ放在RINSE的位置。 3、查看仪器的洗液瓶和废液瓶 CA1500血凝仪日常操作流程 四、准备标本:将样本离心好,放入样本架,再将样本架放到仪器进样器上。样本离心要求 3000转15分钟 五、输入检测项目:主菜单上的按下Work List键,进入工作菜单。 输入项目,直接点击相应的实验项目键。如:按下PT键菜单由“—”变为“○ ”(其他项目输入方法相同)。 重复:按屏幕下菜单的Repeat键,在屏幕弹出的键盘上输入相应测试数,仪器会自动重复与光标所在位置相同的测试信息。屏幕右侧的光标移动键,(按NEXT或Pre表示翻到下一个界面,按“↑”表示向上移动光标,“← 或 →”显示下一个界面试验项目) 输入样本号: 按屏幕下菜单的ID No.Entry按顺序输入样本的序号或病人的病历号。 开始检测:录入完所有测试信息,按下屏幕右上角STAR键,开始检测 查看结果:返回到主屏幕,检测的项目如果由“◎”变为“●”表明此试验已经完成。 按下Stored Date(储存结果)键,出现已存储结果界面,屏幕显示已完成的测试的信息。如果查看反应曲线,按下边菜单第一项Graph查看凝集趋势、吸光度、错误信息等。 CA1500血凝仪日常操作流程 六、洗针: 当做完一批标本以后,需要洗针,按下“Rinse Probe” 然后按下“Execute”进行洗针。 七、关机: 回到主屏幕下,在洗完针以后方可关机,切断电源。 每24小时应关机一段时间,因为: 1.延长光源寿命;2.提高工作速度(软件); 3.维持负压平衡;4.仪器的清洁维护需要,等。 标准曲线的制备 在PT、APTT和Fbg三个检测项目中,APTT报告结果为秒数(仪器实测),不需要制备标准曲线;PT要报告PT%要报告活动度,所以需要制备标准曲线;Fbg报告结果为浓度,所以需要制备标准曲线。 制备过程如下
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