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* 实验一、观察DNA 、RNA在细胞中的分布(1-p26) 实验原理 染色剂 染色颜色 主要存在部位 DNA RNA 吡罗红 甲基绿 红色 绿色 主要在细胞核,线粒体、叶绿体含少量 主要在细胞质 取口腔上皮细胞制片(将载玻片烘干) 水解 冲洗涂片 染色 观察 (先低倍镜再高倍镜/选择染色均匀、色泽浅的区域) (8%的HCl,能改变细胞膜的通透性,同时使DNA与蛋白质分离) 人口腔上皮细胞DNA、RNA分布 洋葱鳞片叶内表皮细胞DNA、RNA分布 (蒸馏水) (0.9%的NaCl) 观察的是死细胞 实验二:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(1-p18) 1、实验原理: 3/蛋白质 + 双缩脲试剂 紫色反应 脂 肪 + 苏丹IV 红色 2/脂 肪 + 苏丹III 橘黄色 1/还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀 2、实验材料 还原糖:应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨等 脂肪:选择富含脂肪的种子,如花生、蓖麻种子(实验前一般需浸泡3-4小时) 蛋白质:可选富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清等 葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。 3、实验步骤 1)可溶性还原糖的鉴定 [原理:-CHO+Cu(OH)2 -COOH+Cu2O 砖红色 ] 制备组织样液: 检测样液: 加入2ml组织样液 加入1ml新配制斐林试剂(浅蓝色) 水浴煮沸2min左右 观察颜色变化: (浅蓝色 棕色 砖红色) 2)脂肪检测与鉴定 染色: 滴苏丹Ⅲ染液2-3滴与花生子叶切片上 染色2-3min后吸去染液 滴体积分数50%的酒精洗去浮色 洗去多余酒精,再滴蒸馏水1-2滴,盖盖玻片 观察: 低倍镜 高倍镜(橘黄色(红色)脂肪颗粒) 制作切片: 生物组织中脂肪的鉴定 3)蛋白质鉴定 [原理:-CO-NH-(类似双缩脲H2NOC-NH-CONH2结构)与Cu2+作用形成紫色络合物—双缩脲反应] 制备样液: 检测与观察: 取2ml样液 加入双缩脲试剂A液1ml(0.1g/ml的NaOH溶液,创设碱性环境)摇匀 加入双缩脲试剂B液(0.01g/ml的CuSO4溶液,提供Cu2+)4滴,摇匀 观察(紫色) ※显微镜下视野大小、明暗问题 低倍镜:物象小,数目多,视野大,视野亮; 高倍镜:物象大,数目少,视野小,视野暗。 显微镜目镜为10 × ,物镜为10 × 时,视野被相连的64个细胞所充满,若目镜不变,物镜转换为40×,则在视野中可以观察到的细胞数为( ) A、2 个 B、4个 C、8个 D、16个 变式:显微镜目镜为10 × ,物镜为10 × 时,视野中看到一行相连的细胞共64个,则换40×物镜后,视野中的细胞数目为( ) 【例】 B D 2、放大倍数问题 ②放大倍数的变化与视野中细胞数量的关系 题型一:一行细胞数量变化 →放大倍数(反比) 题型二:圆形视野中细胞数量变化 →放大倍数的平方(反比) 高倍显微镜的使用 如图所示,①②为两种放大倍数不同的物镜,③④为两种放大倍数不同的目镜,⑤⑥为观察时物镜与玻片标本间的距离,下列哪种组合观察到的细胞数目最多?( ) A、①③⑤ B、②④⑥ C、①④⑤ D、②③⑤ ① ② ③ ④ ⑤⑥ C 【例】 ③放大倍数与镜头长度的关系: 目镜越长放大倍数越小, 物镜越长放大倍数越大。 高倍显微镜的使用 4、成像:显微镜下所成的物像是倒立的像,上下左右均颠倒,即是旋转180度 做题小技巧: 判断物像的简便方法:即把纸张旋转180°直接观察 【例】 高倍显微镜的使用 课堂练习 (1)在视野中,标本物像偏向视野左上方,欲将其移到视野中央,应将装片移动的方向是 A、左上方 B、左下方 C、右上方 D、右下方 (2)将“b”字放在显微镜下观察,视野内看
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