常见有毒有害物质的测定(选用)教案.pptVIP

第七章 食品常见有害有毒物质的检测 第七章 食品常见有害有毒物质的检测 内容简介 本章讲述了食品中常见有害有毒物质如有机氯农药、有机磷农药、黄曲霉毒素等的测定方法以及各种测定方法的注意事项。 第一节 概述 有害物质的来源 一、按污染途径分 1、环境污染造成的食品原料污染； 2、食品在贮藏、包装、销售、运输、烹调和加工过程 中被污染。 二、按污染性质分 1、生物性污染物质； 2、化学性污染物质；（主要地位） 3、放射性污染物质。 第一节 概述 常见的有害物质 1.农药 2.亚硝胺和硝基苯 3.黄曲霉毒素 4.苯酚和氰化物 5.非金属毒物 6.金属类毒物 7.动植物毒素 8.一些添加剂的鉴定 9.兽药 第一节 概述 有害物质的检测 一、定性分析 化学分析方法，设备简单、试剂品种少。 二、定量分析 有害物质的含量为百万分之一到亿万分之一，常用仪器分析方法进行测定。 一、气相色谱法 [原理]样品中的有机氯农药经石油醚提取、硅藻土柱层析净化后，采用气相色谱-电子捕获检测器检测，根据色谱峰和保留时间定性、外标法定量。 1、农药提取 2、净化 3、测定 （1）气相色谱参考条件 色谱柱：内径3～4mm，长1.2～2m的玻璃柱，内装涂以OV-7（15g/L）和QF-1（20g/L）的混合固定液的80～100目硅藻土。 （2）电子捕获检测器 汽化室温度：215℃；色谱柱温度：195 ℃；检测器温度：225 ℃；载气（氮气）流速：90ml/min； （3）色谱图 （4）计算 二、薄层色谱法 [原理]样品中的有机氯农药经提取、净化、浓缩、点样后，在氧化铝薄层上被分离，用硝酸银显色后，经紫外线照射可生成黑色斑，与标准品比较定性和半定量。 Rf=斑点移动距离/溶剂前沿距离 具体测定步骤见教材P226-231。 气相色谱法 [原理] 样品中残留的有机磷农药和氨基甲酸酯类农药经有机溶剂提取，并经液-液分配，微型柱净化等步骤除去干扰物质，采用气相色谱-氮磷检测器法检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量。 1.标准溶液的配制 2.试样制备 3.有机磷农药提取 4.有机磷农药净化 5.测定 （1）气相色谱条件； 色谱柱： ①玻璃柱2.6m×3mm （i·d），填装涂有4.5％DC200＋2.5％OV－17的ChromosorbWAW DMCS（80～100目）的担体。 ②玻璃柱2.6m×3mm（i·d），填装涂有 1.5％（质量分数）DCOE－1的Chromosorb WAW DMCS（60～80目） 气体速度：氮气（N2）50mL／min、氢气（H2）100ml/min、空气 50mL／min。 温度：柱温240℃、汽化室260℃、检测器270℃． （2）测定。吸取2～5μL混合标准液及样品净化液，注入色谱仪中，以保留时间定性。以试样的峰高或峰面积与标准比较定量。 6、结果计算 7、16种有机磷农药的色谱图 黄曲霉毒素（Aflatoxins,AFT）是黄曲霉、寄生曲霉及温特曲霉等产毒菌株的代谢产物。分为B、G两大类。 B大类在氧化铝薄层板上紫外线照射下呈现蓝色荧光。 G大类呈现绿色荧光。 AFTB1毒性大，含量多，所以食品常以AFTB1为主要指标。 黄曲霉毒素，是一组化学结构类似的化合物。 已分离鉴定出12种，包括B1、B2、G1、G2、M1、M2、P1、Q、H1、GM、B2a和毒醇。 表1 中国对食品中黄曲霉毒素的最高允许含量 薄层层析法 1、仪器 小型粉碎机、样筛、电动振荡器、玻璃浓缩器、玻璃板5cm×20cm、薄层板涂布器、展开槽(25cm×6cm×4cm)、紫外光灯100—125W、波长365nm滤光片、微量注射器。 2、测定方法 (一)样品处理 (二)黄曲霉毒素提取 (三)测定 1．单向展开法 (1)薄板制备：称取3g硅胶G，加2～3倍量的水，研磨1～2min呈糊状后，倒入涂布器推成5cm×20cm，厚度约0.25mm的薄层板3块。在空气中干燥15min，在100℃活化2h，取出，放干燥器中保存。一般可保存2～3d，若放置时间较长，可再活化后使。 (2)点样 在距薄层板下端3cm的基线上用微量注射器或血红素吸管滴加样液。 第一点：10μl AFTB,标准使用液(0.04μg／ml)。 第二点：20μl 样液。 第三节：20μl 样液+10μL0.04μg／ml AFTB1　标准使用液。 第四点：20μl 样液+10μL0.02μg／ml AFTB1标准使用液。 (3)展开与观察