Ch3细胞分离技术分析报告.pptVIP

冷冻干燥技术 广泛应用于药品、生物制品、化工及食品工业。对热 敏性物质如抗生素、疫苗、血液制品、酶激素及其他生物组织，冻干技术非常适用。 十字匀浆器 通用性差； 时间长，效率低； 有些化学试剂有毒 。 化学渗透法优点： 缺点： 对产物释放有一定的选择性，可使一些较小分子量的溶质如多肽和小分子的酶蛋白透过，而核酸等大分子量的物质仍滞留在胞内； 细胞外形完整，碎片少，浆液粘度低，易于固液分离和进一步提取。 不足： 易引起生化物质的变性，须在低温下操作，带来分离、回收化学试剂 的问题。如苯、甲苯、抗生素、SDS、EDTA、变性剂（盐酸胍脲）等化学药品可改变细胞壁或膜的通透性，从而使内含物质选择地渗透出来这种处理方式称为化学渗透法自溶作用。 作用机理： 应用： 化学渗透与机械法比较的优、缺点: ①、②、③ （1）外加酶法 常用的溶酶 溶菌酶 β-1，3-葡聚糖酶 β-1，6-葡聚糖酶 蛋白酶 甘露糖酶 糖苷酶 肽键内切酶 壳多糖酶等 2、酶溶法（Enzymatic lysis）： 原理 外源性酶解—溶菌酶、糖苷酶（β-1,4、 β –1,6）、葡聚糖酶、甘露聚糖酶、蛋白水解酶、α-淀粉酶、纤维素酶、脂酶等 内源性酶解（自溶）——温度、pH、时间、缓冲液浓度、激活剂等 酶选择性的催化细胞壁反应，不破坏细胞内的其它物质。 溶菌酶是应用最多的酶，它能专一地分