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[史上最强生物课件]复习基因工程2010.10.23.ppt
* 基因工程快速复习题 1.基因工程获得的的生物变异属于人工诱变吗? 2.基因治疗需要把缺陷基因诱变成正常基因吗? 3.一种基因探针可以探测出水体中的各种病毒吗? 4.原核基因与真核生物的基因有何不同? 5.基因的编码区能够转录相应的信使RNA,进而指导蛋白质的合成的核苷酸序列,其非编码区有什么作用? 否,基因探针中的碱基排列顺序是特定的,而不同的病毒具有不同的碱基排列顺序。 原核基因的编码区是连续的,没有外显子、内含子。 编码区 非编码区 非编码区 启动子 终止子 原核生物基因的结构 编码区:编码蛋白质的序列 非编码区:不编码蛋白质,对基因的表达有调控作用 启动子:与RNA聚合酶结合的位点,启动基因的转录 终止子:终止基因的转录 编码区 非编码区 非编码区 启动子 与RNA聚合酶 结合位点 外显子 内含子 真核生物基因的结构 终止子 外显子:编码蛋白质的序列 内含子:位于编码区的不编码蛋白质的序列 RNA聚合酶与RNA聚合酶结合位点有什么不同? 真核基因表达过程示意图 鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图 DNA单链 mRNA DNA与RAN分子杂交 6.基因与基因之间的间隔是非编码区吗? 否,非编码区属于基因中有遗传效应的片段,不是基因和基因之间的间隔片段(基因间隔片段没有遗传效应) 下图中a~d表示果蝇X染色体上的几个基因 非基因片段 非基因片段 非基因片段 基因片段a 基因片段b 基因片段c 基因片段d 6.生产上使用的青霉素高产菌株是如何获得的? 7.基因能否通过细胞膜进入细胞? 8.将目的基因导入植物细胞主要有哪些方法? 9.什么生物可以侵入细胞? 10.怎样将基因运送到细胞中? 人工诱变 否,因为细胞膜具有选择透过性,不允许大分子物质(例如基因)通过细胞膜。 病毒 运载体 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 11.基因运载体有哪些种? 质粒、λ噬菌体、动植物病毒 12.基因工程的运载体主要有哪些特点? ①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制; ②有多个限制性核酸内切酶切割位点,以便与 外源基因连接; ③具有某些遗传标记基因,以便进行筛选。 13.基因表达载体主要由哪四个主要部分组成? ⑴启动子, ⑵终止子, ⑶标记基因, ⑷目的基因。 14.要使目的基因在载体中正常表达,在构建基因表达载体时需要注意哪些问题? 应该将目的基因插入载体的启动子后面,或者在插入之前对目的基因进行修饰,加上启动子,才可能表达。 15.构建重组质粒必需哪些种工具酶? 限制酶,DNA连接酶。 16.限制性核酸内切酶有什么特点? 具有专一性,只能识别DNA分子中特定的脱氧核苷酸序列,并在特定的部位切开两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 结果形成粘性末端或平末端。 在限制酶所识别序列的中心轴线两侧,其双链DNA上的碱基是反向对称重复序列 17.为什么在基因工程中科学家常采用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞? 18.目的基因与运体结合需要哪些条件? 19.怎样使目的基因与载体有相同的粘性末端? 20.将用同一种限制酶处理后的运载体和目的基因混合,至少可以得到几种连接产物? 繁殖速度快、结构简单,容易培养 。 限制酶,DNA连接酶。 用相同的限制酶作为工具酶切割目的基因和载体。 三种 目的基因 载体 同一种限制酶 T4 DNA连接酶 15oC 重组体 载体自连 目的基因 自连 目的基因与运载体结合 21.DNA连接酶的作用是如何将两个DNA片段连接起来的 22.反转录法获得的目的基因与原基因有何不同? DNA连接酶使两条DNA末端通过磷酸二酯键连接起来。是由ATP供能,连接磷酸二酯键的吸能反应。 反转录法获得的基因没有内含子和非编码区。 23.化学合成法得到目的基因有何特点? ①目的基因的全序列必须是已知的, ②碱基的数目相对比较少。 否 24.若已知氨基酸序列推测可能的DNA序列,利用化学合成法获取目的基因与原天然基因相同吗 因为一个氨基酸可能有多个密码子。 有多种 25.若大肠杆菌基因a与长颈鹿基因b控制合成的蛋白质分别含有相同数目的氨基酸,请问a基因与b基因谁含的碱基对多,还是一样多? b基因含的碱基对多(因为真核生物基因的编码区内有内含子)。 26.形成重组质粒是在细胞内还是细胞外完成的? 在细胞外完成。 27.重组质粒上的标记基因的作用是什么? 筛选含有目的基因的受体细胞 28.基因工程的哪些步骤需要使用限制性内切酶? 29.细菌自身的限制酶会对自身的DNA剪切吗? 获取目的基因、构建重组DNA、 目的基因的检测与鉴定。 否,细菌有自我保护
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