微生物消毒与灭菌教案分析.pptVIP

第三章 消毒与灭菌 在医学、兽医学以及工农业生产实践中，常 采用多种物理、化学或生物学的方法来抑制或杀灭物体上和环境中的病原微生物或所有微生物，以切断传播途径，从而控制或消灭传染病，抑制食品、畜产品和生物制品等物品中的微生物生长繁殖，防止其腐败。有关抑制或杀灭微生物的基本方法有以下几种。 1.灭菌（sterilization） 指杀灭物体中所有病原微生物和非病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的方法。 2.消毒（disinfection） 指杀灭物体中的病原微生物的方法。消毒只要求达到消除传染性的目的，而对非病原微生物及其芽胞、孢子并不严格要求全部杀死。 3.防腐（antisepsis） 指阻止或抑制微生物生长繁殖的方法。微生物不一定死亡。 4.无菌（asepsis）指没有活的微生物的状态。采取防止或杜绝任何微生物进入动物机体或其它物体的方法，称为无菌法。以无菌法进行的操作称为无菌操作。 第一节 物理消毒灭菌法 物理因素对微生物的影响 一、热力灭菌法 高温对微生物虽具有明显的致死作用，但不同种类的微生物对热的敏感性有明显的的差异，细菌繁殖体最为敏感，其次是真菌和病毒，细菌的芽孢对热有很强的抵抗力。 热力灭菌的原理——破坏菌体蛋白质、核酸和酶系统而致死微生物。 热力使蛋白质中的氢键破坏使之变性或凝固， 使双股DNA分开为单股，受热活化的核酸酶使单股的DNA 断裂，导致细菌死亡 影响高温灭菌的因素： 细菌对高温的耐受性与细菌种类、发育时期、菌体浓度及细菌所处介质有关。 热力灭菌法分类：干热灭菌 和湿热灭菌两种方法。 二者比较：在同一温度下，后者效力比前者为大。 原因： （1）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固； （2）湿热的穿透力比干热大； （3）湿热的蒸汽有潜热存在。 (1)焚烧法：用火焚烧，是一种彻底的灭菌方法，仅适用于废弃的污染物品和有传染性的动物尸体等。 (2)火焰灭菌法 :火焰直接烧灼，用于接种环(针)和试管口或瓶口的灭菌。。 (3)干烤（热空气灭菌法、干热灭菌法） 灭菌对象：为玻璃器皿、金属器械及不宜遇水的油、脂、凡士林等。 方法——160℃（160－170℃），1－2h（180℃纸、棉塞就可烧焦） 缺点——穿透力差，故需高温、长时间（繁殖体100℃，1.5h杀灭；芽孢140℃，2h可杀灭）——160－170℃，1－2h可杀死繁殖体和芽孢。 ①降到室温（60℃）后再取物品 注意事项 ②温度不能超过170℃ ③物品不宜包、放过紧过厚、帖壁 (1)煮沸灭菌 : 方法：温度在100℃左右，煮沸10～20 min可杀死所有细菌的繁殖 体，芽胞常需煮沸1～2 h才被杀死 。 若在水中加入2-5%酚，则10-15min可杀灭芽胞；若在水中加入1-2%Na2CO3，可提高沸点既可促进芽胞的摧毁，亦可防止金属器械生锈。 应用：灭菌对象:饮水、玻璃器皿、外科器械 煮沸消毒器 (2)巴氏消毒法 ：以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒方法 。 ①低温维持巴氏消毒法 63～65℃ 30min ②高温瞬时巴氏消毒法 71～72℃ 15s ；迅速冷却10℃以下（冷击法） ③超高温巴氏消毒法 132℃管道 1～2s ；迅速冷却——常温保存半年。 (3)流通蒸汽消毒法 ：又叫常压蒸汽消毒法，用普通蒸笼或阿诺氏（Arnold）流通蒸汽灭菌器，在1个大气压下，用100℃左右的水蒸汽，30min，可杀灭繁殖体。不杀芽孢和霉菌的孢子。 用于食品、食具及不耐用高温的物品消毒。如敷料、糖培养基、半乳糖培养基 (4) 间歇灭菌法 （反复多次流通蒸汽） 利用连续3次的流通蒸汽消毒法，达到彻底灭菌的目的。即将待灭菌物品放入蒸笼（灭菌器）内，加热（约100℃）15-30min，取出置室温(或37℃)24h，次日重复灭菌。连续3次。 用于一些不宜100℃以上温度灭菌物质，以达到杀灭芽胞的目的。常用于含糖、半乳糖、牛乳、血清等培养基的灭菌。 （5）高压蒸汽灭菌法 高压蒸汽灭菌器：15磅（0.105MPa）， /平方英寸，121.3℃温度下维持15～20min 。 应用此法灭菌，一定要充分排除灭菌器内原有的冷空气。用于普通培养基、生理盐水、耐热药品、手术敷料等。 高压蒸汽灭菌器 二、辐 射灭菌法 辐射－－是能量通过空间传递的一种物理现象。能量可借波动或粒子高速运行而传播。用于灭菌的辐射可分为两种。 电离辐射－－α、β、γ、x射线及高