高三生物基因工作.docVIP

第一讲 基因工程 考点导航 1了解基因工程的诞生。 2概述基因工程的原理及技术。 3掌握基因工程的应用。 4简述蛋白质工程。 知识网络 考点梳理（一）DNA重组技术的基本工具 1限制性核酸内切酶——“分子手术刀” （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化来的。 （2功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并能将每一条链上特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键切开。 （3）切割方式：①在中心轴线两侧将DNA切开，切口是黏性末端。②沿着中心轴线切开DNA，切口是平末端。 2DNA连接酶——“分子缝合针” （1）DNA连接酶的分类：E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。 （2）作用及作用部位：E.coliDNA连接酶作用于黏性末端被切开的磷酸二酯键，T4DNA连接酶作用于黏性末端和平末端被切开的磷酸二酯键。 3运载体（运输工具）：质粒 、噬菌体和动、植物病毒等 （1）必备的条件： ① 能在受体细胞中复制并稳定保存； ② 具有一至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入； ③ 具有标记基因，供重组 DNA的鉴定和选择； ④ 对受体细胞无害，不会影响受体细胞正常的生命活动。 （2）常用运载体——质粒：裸露的，结构简单且独立于细菌DNA之外的，具有自我复制能力的小型环状DNA分子。 (二) 基因工程的基本操作程序 1目的基因的获取： ① 直接从生物体中提取总DNA，构建基因