分子生物学内容-实验教案分析.doc

讲 次 1 日 期 2013-11-11 节 次 1-2,3-4节 授课内容 实验一 实验基础仪器设备及基本技能 授 课 学 时 2 教学目的 通过板书、实物演示、操作等教学方式，让学生初步学习和掌握分子生物学实验的基本知识和基本技能，了解分子生物学实验常用仪器设备，熟悉常用仪器设备、耗材。 教学重点 分子生物学实验的基本技术和技能，分子生物学实验中常用的仪器设备使用方法及注意事项。 教学难点 分子生物学实验中常用的仪器设备使用方法及注意事项。 教 具 和媒体使用 黑板教学 教学方法 讲授法、操作演示法 教 学 过 程 课程介绍5分钟 新课讲授90分钟 分子生物学实验规程分子生物学实验设备℃、-20℃、-70 ℃--样品、试剂和材料等的保存 恒温培养箱：细菌平板的培养 恒温空气摇床；菌体的培养 灭菌器: 培养基、试剂、耗材等的灭菌 PCR仪：PCR 扩增、保温实验等 恒温水浴及微量加热器：保证实验温度的恒定 电泳仪：电泳时提供电压和电流 电泳槽：核酸或蛋白质的电泳定性分析时的凝胶支架 凝胶成像系统：电泳结果的定性和定量分析 紫外分析仪：电泳结果的定性分析 台式高速冷冻离心机：样品的分离 分光光度计：样品的定量测定 超净工作台：提供洁净工作环境 pH 计：精确的pH值测定 移液器；液体试剂的精确取量 制冰机：保证操作过程中温度的恒定 总结5分钟 思考题 1、完成一篇分子生物学实验安全预案。 讲 次 2 日 期 2013-11-13 节 次 1-2,3-4节 授课内容 实验二 实验准备及实验规范训练 授 课 学 时 2 教学目的 学会分子生物学常用仪器设备的使用方法和试剂的配制方法，配制实验三所需的药品 教学重点 分子生物学常用仪器设备的使用方法和试剂的配制方法 教学难点 配制实验三所需的药品 教 具 和媒体使用 黑板教学 教学方法 讲授法、实验操作法 教 学 过 程 上节课程总结5分钟 新课学习90分钟 分子生物学实验分子生物学实验分子生物学基本技术 仪器在未经培训前，不得擅自使用 严格按操作规程使用仪器， 有些仪器必须有教师在场时才能使用，并由教师操作 违反规定的使用者，造成的后果由使用者承担 2.2实验规范训练－量程的选择 天平 烧杯、量筒、容量瓶、试剂瓶－－不同规格 量程的选择－移液器 2.3 实验规范－实验操作 详细记录和分析实验结果并按时提交实验报告 实验中一定要处处用心、勤动手，多问为什么 仔细操作和观察 保留好每一步的实验样品，在确准的情况下才能当废液扔掉 3. 配制试剂： 蛋白酶K购自美国Promega公司； Tris、EDTA、SDS、Tris 饱和酚、三氯甲烷、无水乙醇、硼酸、冰乙酸等均购自北京及其他国内外化学试剂公司。提取DNA所用相关溶液的配制（试剂的配制若无特别要求，均以蒸馏水为溶剂，高压灭菌条件为121℃（1.034×105 Pa）、25 min）： ⑴ 1 M Tris.CL （pH 8.0）：称Tris 121.1 g, 溶于800 ml蒸馏水中，用磁力搅拌器搅拌，用浓 HCl 调pH至8.0，定容至1 000 ml，分装后高压灭菌。 ⑵ 0.5 M EDTA（pH 8.0）：称186.1 g EDTA 溶于800 ml蒸馏水中，用NaOH调pH至8.0，加水定容至1 000 ml，高压灭菌。 ⑶ 0.5 M NaCL：5.844 g NaCL溶于双蒸水中，定容至200 ml, 高压灭菌。 ⑷ SDS（10％）：在900 ml水中溶解100 g电泳级SDS，加热至68℃助溶，用盐酸调pH至7.2, 加水定容至1 000 ml，过滤膜过滤，室温保存，无需灭菌。 ⑸ 组织DNA提取液配方：1M Tris.CL (pH 8.0) 5 ml，0.5 M EDTA (pH 8.0）20 ml，0.5 M NaCL 20 ml，10% SDS 10 ml，双蒸水45 ml。 ⑹ 蛋白酶 K（20 mg/ml）：200 mg蛋白酶K溶于10 ml双蒸水，以1ml分装，(20℃冻存。 思考题 1、完成训练过程，记录仪器使用心得。 2、配制试剂中出现何问题？如何处理？ 讲次 3 日 期 2013-11-18 2013-11-20 节 次 1-4节 授课内容 实验三 组织基因组DNA的提取 授 课 学 时 4 教学目的 掌握动物总DNA的抽提方法和基本原理。 教学重点 动物总DNA的抽提技术和基本原理。 教学难点 动物总DNA抽提的基本原理。 教 具 和媒体使用 黑板教学 教学方法 讲授法、实验操作法 教 学 过 程 上节课程总结5分钟 新课学习190分钟 一