紫外可见分光光度计技术讲座资料.pptVIP

举例： 比如对某生物酶检测：假设测定的吸光度为1.95Abs,要求达到1%误差；仪器的杂散光为0.2%，行不行？ 不行！为什么？因其误差为3.6%！只有当仪器的杂散光为0.05%,才可达1%! 见前图。 不同程度杂散光对比尔定律的偏离 0.1%T 三、噪声定义： 无样品时仪器自身的波动。 也就是说：噪声是叠加在待测量的分析信号中不需要的信号，即零信号上下波动的振幅宽度。重要性： 光度噪声影响光度测量的灵敏度（信噪比）、精密度和准确度。限制测定浓度的下限，是分析误差的主要来源。主要来源： 光学系统、光源、检测器、电子元器件及电路设计等。 噪声的测定： 在时间扫描方式下，于500nm波长处连续测量120秒钟，由所记录的吸光度—时间光谱图量出峰——峰值即为仪器的噪声。改变仪器的响应时间可改善信噪比。 噪声与吸光度相对误差和吸光度真值的关系 四、稳定性定义： 是指不放置样品情况下，零吸收读数在一定时间内偏离的程度（1小时内仪器自身的漂移量）。影响稳定性的主要因素： 光源（氘灯：电源1%-光6.7%；钨灯：电源1%-光3.4% ） 光电倍增管(电源1%-放大后的信号12% ) 温度、环境等重要性： 同样是分析误差的主要来源。影响测定的重现性与准确度，严重甚至根本无法测定。测定方法： 在时间扫描方式下，仪器预热2h，于500nm波长处连续测量1小时，由所记录的吸光度—时间光谱图曲线的峰—峰值检查仪器的稳定性。 五、基线平直度定义： 基线平直度是指不放置样品情况下，全波段扫描（需先进行全波段范围基线校正），基线倾斜或弯曲的程度以及各个波长点的光度噪声（P-P）。 原因： 光学系统失调； 参比光束与样品光束不平衡； 仪器受震、光源位置改变。 重要性： 它是各个波长上主要分析误差的来源之一，平直度不好使样品吸收光谱中各吸收峰之间的比值发生变化，给定性分析造成困难。 六、波长准确度与重复性 波长准确度：多次测量平均值与真值之差。 波长重复性：多次测量值中最大最小值之差。 波长重复性在扫描速度、分光带宽、吸光度一 致情况下主要体现为仪器机械重复性。 测定方法：用汞灯（546.07nm、253.65nm)、 氘灯(656.1nm、486.0nm) 或者用标准滤色片。 重复单向扫描三次，计算最大差值。 重要性：吸光度是随波长而变化的，波长准确度、重复性不 合格，何谈分析 七、 光谱带宽(SBW) 定义：谱线的半宽度。 SBW不等于狭缝宽度，关系如下： SBW=d（λ/mm)×b（mm) b---狭缝宽度，以mm计。d(λ/mm)---倒线色散率。 SBW的重要性：影响光度准确度和分辨率。 如何影响分析测试结果？见下图： 光谱带宽与光度准确度的关系 谢 谢！ * Notes: * Notes: * Shimadzu has been active in the development of analytical instruments for more than 120 years and offering Solutions for Science since 1875. The history in atomic absorption spectrophotometers reaches back to the 1960‘s, when the first commercial UV has been developed, using flame atomization for determination of 3 elements simultaneously, the MAF. Now, after more than 30 years of experience in field of UV we are ready to introduce another milestone in the history of successful instruments the new digitally controlled graphite furnace GFA-EX7 and the new mid