紫外分光度法实验要点分析.ppt

第十章 紫外-可见分光光度法 第一节 概述 第二节 基本原理 第三节 紫外-可见光光度计 第四节 分析条件选择 第五节 定性与定量分析 第六节 应用 第一节 概述 物质的颜色与光的关系 三、分光光度计类型 2、标准对照法 （二）多组分的定量分析法 (1)图计算法----两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） (3) 图计算法----两组分吸收光谱完全重叠--混合样品测定 2. 等吸收双波长法- 第六节、紫外吸收光谱在有机物结构分析中的应用 ?⑴　σ→σ＊跃迁 ? ⑶ π→π＊跃迁 ? 生色团与助色团 ? 红移与蓝移 二、紫外可见吸收光谱 2. 物质对光的选择性吸收及吸收曲线 吸收曲线的讨论： 3.紫外—可见分子吸收光谱与电子跃迁 能级跃迁 讨论： 讨论： 2.金属配合物的紫外—可见吸收光谱 电荷转移吸收光谱 四、光的吸收定律 朗伯—比耳定律数学表达式 透光度(透光率)T 2.摩尔吸光系数ε的讨论 （1）物理性因素 (2) 化学性因素 光谱概念 双波长分光光度计 光源 检测器 电磁波谱及光互补规律 光的粒子性 　　当一束平行的单色光通过液层厚度一定的溶液时，在入射光波长、强度和溶液温度等不变时，吸光度Ａ与溶液浓度 c 关系： 比耳定律实验 Ａ＝k c 　　当一束平行的单色光通过浓度一定的溶液时，在入射光波长、强度和溶液温度等不变时，吸光度Ａ与液层厚度Ｌ（b）关系： 朗伯定律实验 Ａ＝k L 朗伯-比耳定律实验 物质颜色产生 物质对光吸收 分光光度计外观 光源 单色器 吸收池 检测器 信号处理显示器 721型可见分光光度计 吸收池 光 比色槽 比色杯 分光光度计原理 单色器光路图 721单束分光光度计 二、 定量分析 分光光度法被广泛的应用在各个领域，环境、医药、石油等测定无机、有机微量成份。由于操作简单，仪器廉价，一般说是常用的首选方法。 （一）单组分的定量分析 1、标准曲线（工作曲线）法： 配制一系列不同浓度的标准溶液，在同一条件下分别测定吸光度，然后以吸光度A为纵坐标，浓度C为横坐标绘制A-C关系曲线。 ●符合朗-伯定律，则得到一条通过原点的直线。 ●根据测得样品吸光度，从标准曲线中求得样品溶液浓度，最后计算含量。 原理:根据朗伯-比尔定律，选择合适λ测A，求出浓度。 以该物质吸收光谱图中?max为入射光，配制一个与被测溶液浓度相近的标准溶液cS，测其AS，再将样品溶液推入光路，测其AX，则试样溶液的浓度cX为： 3、吸光系数法： 根据朗-比定律，从已知的吸光系数K和液层厚度L，根据测得的吸光度值，求出溶液浓度和含量。 例4：P170 例5、6：171 此法适于非经常性的分析工作，准确度不如标准曲线法。 在含有多种组分的溶液中，如果要测定多个组分，可以根据情况的不同，采用不同的方法来进行测定。 测量依据——吸光度的加和性： (1) (2) (3) a 图中，a,b 组份最大吸收波长λmax不重迭，相互不干扰，可以按两个单一组份处理。 (2) 图计算法---两组分吸收光谱部分重叠 ①a、b两组分的吸收光谱部分重叠，此时λ1处按单组分测定a组分浓度，b组分此处无干扰。 ②在λ2处测得混合溶液的总吸光度A2a+b,根据加和性计算cb，假设液层厚度为1cm,则： A2a+b=A2a+A2b=E2a · ca+ E2b · cb (3)图中，a,b 吸收光谱双向重迭，互相干扰，在最大波长处互相吸收。处理方法如下： 1. 解线性方程组法 过程： 注：须满足两个基本条件 选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点 选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大 （三）示差分光光度法（示差法） 普通分光光度法一般只适于测定微量组分，当待测组分含量较高时，将产生较大的误差。需采用示差法。 即提高入射光强度，并采用浓度稍低于待测溶液浓度的标准溶液作参比溶液。 设：待测溶液浓度为cx，标准溶液浓度为cs(cs cx)。则： Ax= E ·L ·cx As = E ·L ·cs ΔＡ＝Ａx －Ａs =E ·b(cx－cs ）=E ·L ·Δc 测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准溶液吸光度差ΔＡ。 示差法测得的吸光度与Δc呈直线关系。由标准曲线上查得相应的Δc值，则待测溶液浓度cx ： cx = cs + Δc (一)有机物的电子跃迁 有机化合物的紫外—可见吸收光谱，是其分子中外层价电子跃迁的结果（三种）：σ电子、π电子、n电子(P 电子)。 分子轨道理论：一个成键轨道必定有一个相应的反键轨道。通常外层电子均处于分子轨道的基态，即成键轨道或非键轨道上。 外层电子吸收紫外或可见辐射后，就从基态向激发态(反键轨道)跃迁。主要有四种跃迁所需能量ΔΕ大小顺序为：