Simultaneouselectrochemicaldetectionofmultipleanalytesbasedondualsignal资料.pptVIP

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* 葡萄糖氧化酶通常与过氧化氢酶组成一个氧化还原酶系统。 葡萄糖氧化酶在分子氧存在下能氧化β -D- 葡萄糖生成D- 葡萄糖酸内酯,同时消耗氧生成过氧化氢。过氧化氢酶能够将过氧化氢分解生成水和1/2 氧,而后水又与葡萄糖酸内酯结合产生葡萄糖酸。 在此过程中,葡萄糖氧化酶的特点是能够消耗氧气催化葡萄糖氧化;每克分子葡萄糖氧化酶在有过氧化氢酶存在下消耗1g 原子氧;在没有过氧化氢酶存在下消耗1g 分子氧,在有乙醇和过氧化氢酶 存在下,也消耗1g分子氧。 * 图a表明了SWCNTs在二甲基甲酰胺(DMF)溶液中有均匀的形态和良好的分散性。 图b是成功的制备的片状、多孔的氧化石墨烯层。 图c 中可以观察到在石墨烯层上有均匀、致密的铂纳米颗粒。可以看到石墨烯层仍然彼此分开、没有聚合,表明纳米复合材料在溶液中的分散性很好。 * 为了进一步分析合成的这种铂纳米粒子-氧化还原探针-石墨烯层的纳米复合材料的化学成分,采用x射线光电子能谱(XPS)表征。 图d中是完全扫描光谱证明C、O元素在氧化石墨烯的存在和N元素是与PEI合成含有-NH2中的N。 图e中S2p峰主要是来源于氧化还原探针甲苯胺蓝;Pt4f的双峰(72.3 eV和75.1 eV)表示PtNPs的存在。此外,观察到的更高的C1s N1s特征峰,这进一步证明了甲苯胺蓝的存在。 图f中可以发现Fe2p特征峰(710 eV和727 eV)来自于二茂铁。由于二茂铁中含有氧元素,所以在图中有一个更高的O1s特征峰。 * 电子转移电阻(Ret) 是电极的一个重要的参数,因此电化学阻抗谱的方法测量适体传感器的特性。我们知道,高频区域的阻抗图显示了有关氧化还原探针(Fe(CN)6)3-/4-的半圆形谱图和EIS的半圆直径等于电子转移电阻(Ret) 。图3说明了不同电极在5毫摩尔每升(Fe(CN)6)3-/4-(含0.1摩尔KCl)的EIS。 a、Ret=120欧姆,较低的电子转移电阻 b、比a有大有效面积,传递电子 c、电极表面吸附了Apt I,半圆半径显著增加Ret=187欧姆,这是因为适配体没有传递电子的能力,阻碍电子在电极的表面的转移。 D、结合了没有传导能力的己硫醇后进一步阻碍电极表面的电子转移。 E、结合了血小板源生长因子和凝血酶后Ret=478欧姆,进一步阻碍电子转移,这是因为互补配对的寡核苷酸适配子和大的分析物,阻碍了电子转移通道。 * 通过在AuNPs@SWCNTs表面分配合适的(血小板源生长因子和凝血酶)适配体I的比例进行了研究,来确定合适的响应电流。 * 图5显示了三明治式适配体传感器的响应电流的情况。可以发现两对稳定的、界限明显的氧化还原峰(曲线a),表明氧化还原探针-石墨烯生物轭合物有良好的电子活性。 为了说明是否是由固定的PtNPs和(葡萄糖氧化酶和辣根过氧化物酶)所具有的催化能力,不同浓度的葡萄糖被添加到溶液中。可以看出随着加入的葡萄糖,还原峰值增加巨大,说明存在一个电催化葡萄糖和过氧化氢的典型过程(曲线b)。 为了进一步证明PtNPs的催化效率,该修饰电极的电化学响应使用多标记的该纳米复合材料(氧化还原探针,bienzyme(葡萄糖氧化酶和辣根过氧化物酶)和Apt II都直接固定在rGS上,没有PtNPs)作为示踪剂被记录(图5 B)。氧化还原探针(曲线a)的峰值电流和电流增量添加葡萄糖(曲线b)都低于该aptasensor。应该归因于PtNPs的使用,这不仅增加了氧化还原探针的固定在rGS,还吸收丰富的酶到他们的活性表面,相应提高了电化学信号。 微分脉冲伏安法,是在滴汞电极每一汞滴生长到一定时刻(一般为1s或2s),在线性变化的直流电压上叠加上一个恒定振幅的脉冲电压(振幅可选择为2~100mV),脉冲时间一般为40~80s。 微分脉冲法记录电流的方法是在每滴汞生长期间记录两次电流,一次是叠加脉冲前的20ms时,另一次是在脉冲结束前20ms的瞬间。 用电流差值(ip=if-ic)与对应的电压作图,得到的图中会出现电流峰,峰的高度与相应分析物的浓度成正比。 当脉冲电压叠加在直流极谱的残余电流或极限扩散电流部分的电压时,都不会使电流发生很大的变化,ip变化很小。当脉冲电压叠加在直流极谱fai1/2(半波电位)的附近时,由脉冲电压所引起的电位变化将导致电解电流发生很大的变化即ip变化很大,在fai1/2(半波电位)处达到峰值。 * Contents Abstract Introduction Experimental Results and discussion Conclusions A sandwich-type electrochemical aptasensor for simultaneous sensitive detection of platelet-d

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