验证方案异烟肼含量.docVIP

验证原因： 验证类型： 新项目验证 再验证 其它 √ 预验证 回顾性验证 转移验证 √ 方法描述： 本分析方法为中国药典2010版二部方法。为确保其检测结果准确，对该分析方法的专属性、精密度（系统精密度、方法精密度、中间精密度）、线性和范围、准确度、耐用性进行评价。 验证依据： 中国药典2010年版分析方法（295页） 验证时间： 2010年07月09日～2010年07月10日 验证项目组成员及职责： 部门 成员 职责 QC 仪器设备的确认 QC 分析方法编写 QC 分析测试 QC 数据评估 质量部 审核批准 验证内容:- 序列号 确认测试项目 可接受标准 01 1 01. 2 仪器设备的确认 高效液相色谱仪的确认 天平的确认 符合仪器设备的确认要求 符合仪器设备的确认要求 02 02.1 具体测试内容 系统精密度 配置1份异烟肼工作标准溶液，连续进针6次，记录异烟肼峰面积、保留时间。 异烟肼峰面积RSD≤2.0%,保留时间RSD≤2.0%。异烟肼理论塔板数大于4000，拖尾因子在0.9～1.4之间。 02.2 方法精密度 平行配制同一批样品的6份样品溶液，每份溶液进样2针，计算样品含量及其相对标准偏差。 样品含量的RSD≤2.0%。 02.3 线性和范围 以异烟肼工作标准品溶液的浓度为100%，配制20%、60%、100%、140%、180%浓度的工作标准品溶液，每个浓度的标准品溶液进样1次，计算出回归方程和相关系数R。 R≥0.999 02.4 准确度 以异烟肼工作标准品溶液的浓度为100%，取同一批样品，配制浓度为80%、100%和120%的样品溶液各3份，每份进样2针。计算其回收率。 该定量方法的回收率应为98.0%～102.0%。 02.5 耐用性 配制异烟酸和异烟肼混合溶液，按下列条件改变方法，稳定后按顺序进样，计算异烟肼的理论塔板数，混合溶液中异烟酸和异烟肼的相对保留时间RRT。 改变流速为0.9ml/min和1.1ml/min。 改变柱温为23℃和27℃。 改变流动相缓冲液与甲醇配比为83:17和87:13。 同一填料不同色谱柱。 理论塔板数大于4000，拖尾因子在0.9～1.4之间,分离度R＞1.5，相对保留时间RRT偏差绝对值不大于20％。 03 03.1 03.2 03.3 03.4 程序及文件 液相色谱仪校正规程 液相色谱仪操作规程 分析天平校正规程 分析天平操作规程 符合要求 符合要求 符合要求 符合要求  验证前准备： 人员培训： 培训人姓名 培训时间 培训内容 仪器设备、标准品和试剂： 仪器设备 仪器名称 型号 编号 校验有效期 标准品和试剂 名称 级别 厂家 批号 样品 名称 厂家 批号 验证过程： 色谱条件 色谱条件 色谱柱：agilent ODS-2 长度：250cm ，内径：4.6mm ，填料 C18 ，填料粒度：5μm 检测波长：262nm，带宽30 柱温：25℃ 进样量：20μl 流速：1.0ml/min 流动相A：0.02mol/l磷酸氢二钠溶液（用磷酸调pH至6.0），流动相B：甲醇 A:B=85:15 停止时间：12min 系统精密度 溶液配制 系统精密度溶液：取异烟肼10mg，置100ml容量瓶中，精密称量，用水溶解并稀释至刻度。 1.2验证过程及结果 系统精密度溶液连续进样6次，记录其异烟肼峰面积、保留时间。 可接受标准：异烟肼峰面积RSD≤2.0%,保留时间RSD≤2.0%。 序号 保留时间(min) 峰面积 1 2 3 4 5 6 RSD% 结论： 重现性试验（方法精密度） 溶液配制 对照溶液：取异烟肼工作标准品10mg，精密称量，置100ml容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度。 方法精密度溶液：取异烟肼样品10mg置100ml容量瓶中，精密称定，用水溶解并稀释至刻度。用此方法配置同一批号的样品溶液6份。 验证程序及结果 工作标准品溶液进2针，样品溶液各进2针。记录异烟肼峰面积，计算样品含量。 可接受标准：异烟肼含量的RSD≤2.0%。 样品批号： 称样量（mg） （X2） （X3） X4） （X5） 线性点溶液浓度(ug/ml) 异烟肼峰面积 线性范围（ug/ml） 线性回归方程 相关系数R 结论： 准确度 溶液配制 对照溶液：取异烟肼1