高产微生物油脂菌株培养基及发酵条件优化方法技术报告.docVIP

高产微生物油脂菌株培养基及发酵条件优化方法技术报告.doc

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课堂报告名称:高产微生物油脂菌株培养基及发酵条件优化方法 课堂报告依据的知识背景 1.微生物细胞的化学组成 ?微生物的六大营养素 ??? 从元素水平还是从营养要素的水平来看,微生物的营养与摄食型的动物(包括人类)和光合自养型的植物非常相似,它们之间存在着“营养上的统一性”(表5-1)。具体地说,微生物的营养要素有六种,即是碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水。 2,微生物的分类 在上述营养类型的分类中,其名称都是按能源和供氢体的顺序来表达的。上述四大类微生物的划分不是绝对的,它们在不同条件下生长时,往往可以互相转变。例如紫色非硫细菌在有光和厌氧条件下生长时,可以利用光来还原二氧化碳,这时它们属于光能自养型微生物。但当它们在有机物存在的条件时,又可以利用有机物与光能生长,此时它们属于光能异养型微生物。异养微生物也不是绝对不能利用二氧化碳,它们当中有许多可以利用二氧化碳,只是它们不能以二氧化碳作为惟一碳源或主要碳源进行生长,而是在有机物存在的条件下也可以利用二氧化碳,将其还原成部分的细胞物质。自养微生物是能利用惟一碳源进行生长。但不是说它们绝对不能利用有机物进行生长。 营养物质进入细胞的方式、 a.单纯扩散不是微生物细胞吸收营养物质的主要方式,因为细胞既不能通过这种方式来选择必需的营养物质,也不能逆浓度运送营养物质。促进扩散只对生长在高营养浓度下的微生物发挥作用。主动运送(active transport)是微生物吸收营养物质的主要方式这种运送方式的营养物主要有无机离子、有机离子(如氨基酸)和一些糖类(如乳糖、蜜二糖或葡萄糖)等。的营养物主要有无机离子、有机离子(如氨基酸)和一些糖类(如乳糖、蜜二糖或葡萄糖)等。——高温 1、干热灭菌法 干燥热空气灭菌法:将物品放入烘箱内,然后升温至150℃~170 ℃ ,维持1~2小时。适用于玻璃、陶瓷和金属物品的灭菌,不适合液体样品,及棉花、纸张、纤维和橡胶类物质的灭菌。 灼烧法:是将被灭菌物品在火焰中燃烧,使所有的生物质碳化。简单、彻底,但对被灭菌物品的破坏极大。适用于无经济价值的物品灭菌,及不怕烧的实验器具,如接种环、镊子、试管或三角瓶口的灭菌等。 特点:由于空气传热穿透力差,菌体在脱水状态下不易杀死,所以温度高、时间长。 2、湿热灭菌法 100 ℃以上的加压蒸汽进行灭菌。 同温同压和相同作用时间下湿热比干热灭菌更好。 湿热对一般营养体和孢子的杀灭条件: 1、多数细菌和真菌的营养细胞:在60℃左右处理5~10min; 2、酵母菌和真菌的孢子:用80℃以上温度处理; 3、细菌的芽孢:121℃处理15分钟以上; 湿热灭菌法分类 1、常压法 (1)巴斯德消毒法 低温维持法: 63℃,30min处理牛奶。 高温瞬时法: 72℃,15s处理牛奶。 (2)煮沸消毒法 将水加热至100℃15min~30min,可杀死所有营养细胞和部分芽孢,达到消毒物品的目的。 (3)间歇灭菌法(分段灭菌法、丁达尔灭菌法) 过程如下: 80 ~ 100℃下蒸煮15~ 60min(杀灭其中所有的微生物营养体); 室温或37℃保温过夜(诱使其中残存的芽孢萌发); 第二天再以同法蒸煮和保温过夜; 如此连续重复3天,即可在较低的温度下达到彻底灭菌的效果。 适用于不耐高温的物品灭菌,如不适于高压灭菌的特殊培养基、药品的灭菌。 缺点是麻烦、费时。 (2)连续加压蒸汽灭菌法(连消法) 加压条件下,培养基在管道的流动过程中快速升温、维持和冷却,然后流入发酵罐。 (1)可以减少培养基中的有效成分因长时间加热而遭受的破坏; (2)所用时间短,提高发酵罐的利用率; (3)提高锅炉使用效率; (4)适宜工业化生产 。 利用温度进行杀菌的定量指标 热死时间:在某一温度下,杀死某微生物的水悬浮液群体所需的最短时间。如:E.coli在60 ℃下为10min。 热死温度(热死点):在一定时间内(一般为10min),杀死某微生物的水悬浮液群体所需的最低温度。 多数细菌、酵母菌、霉菌的营养细胞和病毒,在50~65 ℃ 10min即可致死。梅毒螺旋体43 ℃ 10min即可致死。 撰写课堂报告的目的 1.了解微生物营养与生长的相关知识; 了解培养基成分、类型; 熟悉高产油脂微生物的种类; 学会用培养基培养筛选需要的菌株; 学会优化培养基发酵条件。 撰写课堂报告的思路 通过对微生物营养与生长相关知识的学习掌握,围绕高产油脂菌株培养基优化与培养条件优化这一研究问题,通过对高产油脂菌株的特点进行分析,寻找培养基优化和培养条件优化最佳方法,初步构建高产油脂菌株的培养基与培养条件优化的方法体系。 课堂报告的正文 1.产油脂微生物 微生物油脂 又称单细胞油脂,是酵母、霉菌、细菌和藻类等微生物在一定的条件下,

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