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- 2016-04-22 发布于湖北
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植物有丝分裂的制片与观察 王飞 实验目的 掌握植物根尖细胞有丝分裂的制片技术 观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形态特征及染色体的动态变化行为 实验材料及流程 大蒜 2n=16 生根-取材-前处理-固定- 解离-漂洗-染色-压片-镜检 生根(已完成) 取材(已完成) 前处理 目的:获得大量有丝分裂期细胞 方法:0.1%秋水仙素处理2-4h 原理:抑制纺锤体(微管)形成,姐妹染色单体无法顺利分离,大量细胞被阻断在有丝分裂中期。 本次试验略去此步骤 固定(已完成) 解离 目的:破坏细胞间果胶质和纤维素,使细胞容易散开 方法:1M HCl 烧杯60℃预热 处理5min 注意:每组统一用纱布取根尖样本,流水漂洗数秒,转移样本到烧杯内并计时 漂洗 目的:去除残留的盐酸,恢复低渗环境 方法:纱布内用蒸馏水或清水漂洗干净,之后在平皿中浸泡待用 剥离分生组织 1 截取3mm左右根尖区域,置于载玻片上 2 用解剖针去除半透明状非分生组织,留取白色分生组织 3 滤纸吸干多余水分后用解剖针将组织碾碎(利于染色) 注意:宁滥毋缺 染色 染色液:石碳酸品红(卡宝品红),染色质特异染料 步骤: 1 滴加1-2滴染色液 2 酒精灯加热2秒钟(可略) 3 染色5min 压片 单侧慢放盖玻片 滤纸吸干多余液体 镊子轻敲使细胞分散 如镜检发现细胞分散不完全可重复按压细胞 镜检 10倍或4
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