第八章植物种质资源的保存摘要.pptVIP

植物材料（培养物）的选取 物种、基因型、器官、抗寒性、年龄、生理状态等。 植物细胞培养物的生理状态是决定冻后细胞成活率的重要 因素。一般指数生长期和生长延滞后期的细胞抗冻力强，存活率高。 植物材料（培养物）的预处理 为了使保存材料达到超低温保存所要求的生理特性，还要对材料进行预处理，总的原则是提高细胞分裂与分化的同步化，减少细胞内自由水的含量，增强细胞抗寒力。 目前主要有3种预处理方式： （1）低温锻炼 激活植物体内抗寒机制 （2）继代培养 增加有丝分裂细胞数目 （3）预培养 培养基中加冷冻保护剂或诱导抗寒力物质 植物材料（培养物）的冷冻处理 降温冰冻方法是影响超低温保存效果的关键因素之一。 冷冻的4种方法 快速冷冻法 慢速冷冻法 分步冷冻法 干燥冷冻法 （1）快速冰冻法 将材料从0℃或预处理温度直接投入液氮，其降温速度在1000℃/min以上。这个过程可以使细胞内的水分子还未来得及形成结晶中心就降到了-196℃的安全温度，从而避免了细胞内结冰的危险。此法适用于那些高度脱水的材料，如种子等。 要求细胞体积小、细胞质浓厚、含水量低、液泡化程度低的材料。 （2）慢速冰冻法 将处于0℃或其他预处理温度的材料以0.5-2℃/min的降温速度从起始温度降到-40℃，稳定10分钟后，投入到液氮保存或以此降温速度连