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基因工程专题习题
一、回答有关基因工程的问题。(10分)
下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割微点,图一、图二中箭头表示相关限制酶的酶切位点。
64.限制酶Sma I和限制酶Xma I作用的相同点是________________________________,不同点是____________________________________________。
65.研究发现复制原点的碱基序列特点通常含A、T碱基较多,其意义是_______________________。
66.图二中的目的基因需要同时使用Mse酶和Pst I酶才能获取,而图一所示的质粒无相应的限制酶切位点。所以在用该质粒和目的基因构建重组质粒时,需要对质粒改造,构建新的限制酶切位点。试写出构建需要的限制酶切位点的过程(提供构建需要的所有条件):
①首先用_______________酶处理质粒;
②然后用DNA聚合酶处理质粒,使被酶切开的质粒末端连接上相应的脱氧核糖核苷酸;
③再运用_______________酶处理质粒,从而形成新的限制酶切位点,即可被__________酶识别。
基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。下图表示运用影印培养法(使在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入大肠杆菌。
67.培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基A和培养基B分别还含有______________、________________。从检测筛选的结果分析,含目的基因的是__________菌落中的细菌。
二、人类是乙型肝炎病毒的唯一宿主,现有的肝硬化、肝癌多从乙肝发展而来,接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。乙型肝炎疫苗的研制先后经历了血源性疫苗和基因工程疫苗阶段。
血源性“乙型肝炎疫苗”是取用乙肝病毒感染者的血液,用高速离心提纯血液中的乙肝病毒,之后再灭活,制成乙肝疫苗。乙肝病毒结构中的 成分是激发免疫反应的抗原。
乙肝工程疫苗的生产和使用过程如下:
56. 从上图可知,该目的基因的具体功能是
57. 若要迅速获取大量的目的基因,以提高重组质粒生产的效率,常用的技术是(写全称) 。
过程①合成重组质粒需要限制酶,还需要 酶
58. 用基因工程疫苗接种比血源性疫苗更安全,试从疫苗的结构特点解释原因:
59. 目的基因在人体细胞和大肠杆菌细胞中均能表达出相同的抗原,这是因为
原因所致。
形成有效的重组质粒,选择适当的限制性内切酶很重要。下图1示意大肠杆菌质粒的相关基因与限制酶切点;图2示意有关限制酶在DNA分子中的具体切点。
要成功转入目的基因,有两种选择限制酶的方案,它们分别是
或 。其中有一组方案重组效率较高,其原因是
61. 用上述两种方案酶切大肠杆菌质粒与目的基因,再一并加入相关合成酶。一段时间后,最多可以获得 种含完整四环素抗性基因的质粒。
62. 写出筛选、获取含有目的基因大肠杆菌的培养和鉴别方法:
。
三、大肠杆菌与人类的生产生活密切相关。据图表回答下列有关问题:
63.科研人员用放射线处理某大肠杆菌获得两个突变株A和B,然后对A和B进行实验,结果如上表。
①突变株A不能在一般培养基上生长的直接原因是______________________________。将突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中,却能正常生长的最可能原因是______________ ______ ____。
②根据上表可知,营养物质甲、乙对突变株A、B来说属于___________________(成分)
64.上图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。大肠杆菌pUC118质粒lacZ基因中lacZ基因便可表达出(半乳
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