03轮腺综述资料120727.docVIP

轮状病毒/腺病毒抗原检测试剂盒（胶体金法） 综述资料 一、选题目的 婴幼儿腹泻病是世界范围内影响儿童健康的常见病和多发病。病毒性腹泻是导致全球儿童急性重症腹泻的重要原因，此病也是发展中国家小儿死亡的主要疾病。全世界每年因轮状病毒感染导致的婴幼儿死亡的人数大约为900000人，其中大多数发生在发展中国家。在我国，0～2岁以内的婴幼儿人数约为4000万人（含新生儿），每年大约有1000万婴幼儿患轮状病毒感染性胃肠炎，占婴幼儿人数的1/4是引起婴幼儿严重腹泻的最主要病原。(enteric adenovirus，EAdv)是20世纪80年代发现的一种新的导致婴幼儿腹泻的主要病原。近年来的研究表明EAdv在免疫缺陷患儿中可增加发病率和延长住院时间 ，国内外有暴发或流行的报道。许多国家已将EAdv的检测列入腹泻病的常规检查。但我国目前对EAdv的基础、临床及流行病学的研究还比较缺乏。近年来，随着临床检测技术的提高，对其研究不断深入，其危害性日益受到临床医生的重视。 轮状病毒/腺病毒引起的腹泻均需要以补液治疗为主，与其他腹泻有明显的不同，抗生素治疗有害无益。轮状病毒/腺病毒胶体金试剂检测不需要任何仪器设备，通过对腹泻病人尤其是婴儿腹泻粪便的检测，有效区分标本中的轮状病毒和腺病毒，以便临床及时进行有针对性的治疗。症状表现 轮状病毒肠胃炎是一种从温和到严重的疾病，有一些表征像是呕吐，水状腹泻，以及低程度的发热。当儿童受到这类病毒感染时，在症状发生前大约会有两天的潜伏期（incubation period）。症状通常是从呕吐开始，接着是四到八天的大量腹泻。轮状病毒感染较容易造成脱水的细菌性病原体还要更常引起脱水的现象，脱水成为轮状病毒感染的最常见的死因。 在人一生中，感染轮状病毒A种会有这样的经过：第一次感染通常会产生症状，但是下一次的感染通常会是典型的无症状，因为免疫系统提供了部分的保护机制。所以，感染症状发生的比例于两岁以下的儿童最高，之后渐渐降低直到45岁为止。虽然新生儿感染的机会很常见，但是通常都是温和的症状或是无症状疾病；最严重的症状都会发生在比较大一点的出生六个月到两岁的小孩，以及发生在有免疫缺陷的小孩身上。因为从童年获得的免疫力，大部分的成人对于轮状病毒并不易受到影响；成人发生的肠胃炎通常是因为其他因而非轮状病毒，但是成人的无症状感染依然在社群中带有感染症的传染性。有症状的再感染通常因为感染了不同血清型的轮状病毒A种。 潜伏期10天左右。主要症状是腹泻，呈水样便或稀便，量或多或少。儿童每天排便最多8～9次，病程一般4～8天。各型腺病毒所致腹泻持续时间不等，以肠腺病毒胃肠炎腹泻时间最长，大多患者有呕吐，持续1～2天，少数有发热。非肠型腺病毒腹泻患者发热较多。约20％腺病毒肠炎患者有呼吸道症状。粪便排病毒时间1周左右。 腺病毒肠炎病情一般较轻，少数有严重脱水或同伴其他系统感染需住院治疗。轮状病毒感染的诊断正常都是诊断出肠胃炎并且有严重腹泻的状况之后。大部分的因为肠胃炎进入医院的儿童病患都被检测出轮状病毒A种。对于轮状病毒A种传染病的专门诊断方式是对病患的粪便利用酵素免疫分析法去作病毒的识别。市场上已经有几种核准的监测设备，这些监测设备对于轮状病毒A种的所有血清型都可以敏感，个别的检测出来。其他的检验方法，如电子显微镜法或是凝胶电泳法，则是使用在研究实验室之中。逆转录聚合酶链锁反应（RT-PCR）可以检测并识别所有种与所有血清型的人类轮状病毒(1) 电镜和免疫电镜：电镜直接观察标本中腺病毒颗粒，粪便中病毒颗粒多，形态独特，易于辨认，但不能分型，且要求条件高、费时、灵敏度不高，不适用于流行病学调查。免疫电镜技术的运用提高了检测灵敏度，并且能区分不同的血清型。 (2)细胞培养：EAdv可在张氏结膜细胞、Craham293、HT-29、Hep-2、第3代食蟹猴肾细胞中生长，但只有Craham293细胞对EAdv有较高的易感性。 (3)血清学实验：① 中和试验：是检测腺病毒的经典方法，可对腺病毒分型，但该法需要的病毒量大，需用特异性抗体；②补体结合试验：不能确定腺病毒基因的特异性；③血凝抑制试验(HIA)：测定EAdv的特异性较高，但不能对其进行分型。 (4)免疫学实验：① 酶联免疫吸附试验(ELISA)：试验的特异性和敏感性较高且快速、特异、操作简便，与HIA联合用于检测EAdv及对腺病毒进行分型；② 免疫斑点法(DIA)和免疫亲和层析：这两种方法均比ELISA 和IFA更为简便快捷、经济且易于推广，适用于腺病毒性腹泻患者的快速诊断及其流行病学调查 。 (5)分子生物学检测方法：①DNA分子杂交法：可用于EAdv的检测和分型，该法特异性高，不依赖细胞分离病毒，诊断迅速，但DNA探针制备过程复杂，技术要求高，且标记物的半衰期短；② 基因电泳：取