酶的制剂形式: 结晶: 固体:干燥(冰冻升华,喷雾干燥,真空干燥) 液体:低温(0-4℃,-20℃) 提高酶蛋白的浓度 加入稳定剂 固定化 保存: 通常将纯化后的酶溶液经透析除盐后冷冻干燥得到酶粉,低温下可较长时期保存。 也可将酶溶液制成25%甘油或50%甘油分别贮于—25℃或—50℃冰箱中保存。 注意:酶溶液浓度越低越易变性,因此切记不能保存酶的稀溶液。 酶的分离纯化工作中的注意事项 1. 防止酶蛋白变性 2. 防止辅因子丢失 3. 防止酶被蛋白 水解酶降解 采取的措施: 1.避免泡沫的生成 2.加入金属鏊合剂EDTA 3.加入巯基试剂,如巯基乙醇、二硫苏糖醇(DTT)等 4.加入蛋白酶抑制剂 衡量分离提纯方法优劣的指标: 总活力的回收 (表示提纯过程中酶的损失情况) . 比活力提高的倍数(表示提纯方法的有效程度) 。 总活力=活力单位数/ml酶液×总体积(m1) 比活力=活力单位数/mg蛋白(氮)=总活力单位数/总蛋白(氮)mg 纯化倍数=每次比活力/第一次比活力 回收率(产率)=每次总活力/第一次总活力×100% 二、酶活性测定 (一)、酶活性 1. 酶活性或酶活力 (Enzyme activity)
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