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-学高中生物专题2第2节第1课时动物细胞培养和核移植技术课件新人教版选修3资料.ppt

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* 生物选修3(人教版) 专题2  细胞工程                  第2节  动物细胞工程 第1课时 动物细胞培养 和核移植技术 要点突破 知识点1 动物细胞培养 1.概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 2.过程。 (1)取材:培养的动物细胞大部分取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织,是因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛,分裂能力强。 (2)细胞贴壁和接触抑制:将细胞悬浮液置于适宜环境条件的培养瓶中培养,悬浮液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。 (3)原代培养和传代培养。 通常将动物组织被胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理以后的细胞的初次培养,称为原代培养。贴满瓶壁的细胞需 要重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖,这种培养即为传代培养。一般也这样认为:10代以内的细胞培养是原代培养,10代以后的细胞培养是传代培养(如下图所示)。 3.条件。 (1)无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌处理;在细胞培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染;定期更换培养液,以便清除代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。 (2)营养物质:需要糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,通常需加入血清、血浆等一些天然成分。 (3)温度和pH:细胞体外培养的适宜温度一般与动物的体温相近,多数细胞生存的适宜pH值为7.2~7.4。 (4)气体环境:主要有O2和CO2。O2是细胞代谢所必需的。CO2的主要作用是维持培养液的pH。 4.应用。 (1)可用于生产蛋白质生物制品,如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。 (2)基因工程中受体细胞的培养。 (3)检测有毒物质,判断某种物质的毒性。 (4)为烧伤病人植皮,用于生理、病理、药理等方面的科学研究等。 5.植物组织培养和动物细胞培养的比较。 例1 回答下列有关动物细胞培养的问题。 (1)在动物细胞培养过程中。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面__________时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的__________。此时,瓶壁上形成的细胞层数是________。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是__________。 (2)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现____________现象;但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成________细胞,该种细胞的黏着性________,细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量________。 (3)现用某种大分子染料,对细胞进行染色时,观察到死细胞被染色,而活细胞不染色,原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。 (4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目,最好选用细胞分裂到________期的细胞用显微镜进行观察。 (5)在细胞培养过程中,通常在________条件下保存细胞。因为在这种条件下,细胞中________的活性降低,细胞__________的速率降低。 (6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了排斥现象,这是因为机体把移植的皮肤组织当作________进行攻击。 解析:在动物细胞的培养过程中,细胞因相互接触而出现接触抑制并具有贴壁现象,可用胰蛋白酶将贴壁细胞分离下来。随着细胞培养传代次数的增多,大多数细胞失去分裂能力而衰老死亡,只有少数细胞仍具有分裂能力,这部分细胞具有癌细胞的特征,其细胞膜上的糖蛋白减少,细胞的黏着性下降。细胞膜具有选择透过性,故染料分子不能使活细胞着色。温度能影响细胞内酶的活性而影响细胞的新陈代谢,故可低温保存培养的细胞。 答案:(1)相互接触 接触抑制 单层(或一层) 胰蛋白酶 (2)衰老甚至死亡 不死性 降低 减少 (3)由于活细胞的膜具有选择透过性,大分子染料不能进入活细胞内,故活细胞不能着色(或由于死细

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