学案 DNA重组技术的基本工具和基因工程的基本操作程序.doc

第十单元 现代生物科技专题 学案49 DNA重组技术的基本工具和基因工程的基本操作程序 考纲要求　 1.基因工程的诞生 Ⅰ 2.基因工程的原理及技术 Ⅱ 复习要求 1．理解基因工程的实质 2．理解基因工程操作的四步曲及其操作实例 基础自查 一．基因工程的概念 基因工程是指 ，通过 技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出 。基因工程是在 水平上进行设计和施工的，又叫做 。 二．基因工程的基本工具 1.限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源： 。 （2）功能： 。 （3）结果：产生的DNA片段末端通常有两种形式： 。 2. DNA连接酶 1 两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）比较： ①相同点： 。 ②区别： （2）与DNA聚合酶作用的异同: 3.载体 （1）载体具备的条件： （2）最常用的是 其它载体： 三．基因工程的基本操作程序 第一步： 原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有 。 ２.PCR技术扩增目的基因 （1）原理： （2）过程：： 。 第二步： 1.目的： 。 2.组成： （1）启动子： 。 （2）终止子： 。 （3）标记基因的作用： 。 第三步： 2.常用的方法： a、将目的基因导入植物细胞方法： 。 b、将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 。此方法的受体细胞多是 。 C、将目的基因导入微生物细胞：最常用的原核细胞是 ，其转化方法是： 。 第四步： 1.首先要检测 ，方法是采用 。 2.其次还要检测 ，方法是采用 。 3.最后检测 ，方法是 ，用 。 4.有时还需进行 的鉴定。如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。 课堂深化探究 一．对基因工程概念的理解 别名 基因拼接技术或DNA重组技术 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 结果 与杂交育种相比 与诱变育种相比 原理 二．基因工程的基本操作工具 1．与DNA分子相关的酶 1 几种酶的比较 种类 项目　　 限制酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 解旋酶 作用底物 作用部位 作用特点 作用结果 2 限制酶与DNA连接酶的关系 2．载体 1 作用 2 具备的条件 3 种类 特别提醒　①一般来说，天然载体往往不能满足人类的所有要求，因此人们根据不同的目的和需要，对某些天然的载体进行人工改造。 ②限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外，这样才能保证标记基因的完整性，有利于对目的基因的检测。 三．基因工程操作程序 基因工程技术生产凝乳酶的过程 1．基因工程的操作程序分析 1 目的基因的获取途径 2 基因表达载体的构建 特别提醒　①插入的目的基因的表达需要调控序列，因而用作载体的质粒的插入基因部位之前需有启动子，之后需有终止子。 ②两次使用的限制酶为同一种酶，这样形成的黏性末端碱基之间互补，便于连接。 3 将目的基因导入受体细胞 转化 生物种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 受体细胞 体细胞 受精卵 原核细胞 转化过程 4 目的基因的检测与鉴定 类　型 检测内容 方　法 结果显示 分子 检测 导入检测 转录检测 翻译检测 个体水平检测 特别提醒：1．在整个工程中，只有第三步将目的基因导入受体细胞过程中不发生碱基互补配对，其他步骤均发生配对。 2．切割质粒和目的基因的限制酶必须是同一种酶，以获得相同的黏性末端，利于基因表达载体的构建。 3．插入的目的基因只是结构基因部分，其表达需要调控序列，因而用作载体的质粒的插入部位前须有启动子，后须有终止子。 4．PCR技术与DNA复制的比较 PCR技术 DNA复制 相 同 点 原理 DNA双链复制 碱基互补配对 原料 四种游离的脱氧核苷酸 条件 模板、ATP、酶等 不 同 点 解旋 方式 DNA在高温下变性解旋 解旋酶催化 场所 体外复制 主要在细胞核内 酶 热稳定的DNA聚合酶 Taq酶 细胞内含有的DNA聚合酶 结果 在短时间内形成大量的DNA片段 形成整个DNA分子 对应训练 1.下列关于基因工程的叙述，错误的是 A．目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物 B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 2.下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是 　　 。 A．一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B．限制性核酸内切酶的活性受温度影响 C．限制性核酸内切酶能识别和切割RNA D．限制性核酸内切酶可从原核生物中提取 3.如图是利用基因工程技术培育转基因植物，生产可食用疫