CpG__ODN的免疫刺激作用.ppt

CpG-ODN的免疫刺激作用 陈军浩 南京大学医学院附属鼓楼医院 CPG概念 为非甲基化的胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸重复序列，即CpG 基序。 一种免疫佐剂 作用靶点TLR9 细胞免疫，体液免疫 Th1免疫应答 慢性乙型肝炎患者细胞免疫低下 HBV免疫耐受，持续感染 肿瘤微小残留病的清除 CPG提高PBMC中Th1细胞 CPG提高PBMC中Th1 、Tc1细胞百分率 CPG刺激BPMC分泌细胞因子 CPG诱导PBMC杀伤靶细胞 收集CPG活化的PBMC 细胞毒性实验：效应细胞为CPG活化的PBMC；靶细胞为CFSE预染的K562细胞。对照组效应细胞为未经CPG活化的PBMC。 效：靶＝20：1，混合培养2h。流式细胞术检测靶细胞死亡率。 CPG诱导PBMC杀伤靶细胞 CFSE染色靶细胞 浓度为5μmol/ L 的CFSE （2羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯）工作液 取对数生长期的靶细胞浓度108/ L 细胞悬液与等体积CFSE 工作液混合 37 ℃孵育10 min。 离心洗涤两次后 悬浮细胞备用 CFSE染色靶细胞 实验结果 CpG活化PBMC对K562细胞的杀伤作用(N=5) CPG活化PBMC 　　16.85±5.14 % 　　对照组　　　　8.62±2.83 % CIK细胞杀伤靶细胞 CIK细胞杀伤靶细胞 研究背景 通过主动免疫、过继特异性免疫、