广东工业大学-生物化学-第六章核酸资料.ppt

?DNA的基本功能是作为遗传信息的载体，为生物遗传信息复制以及基因信息的转录提供模板。 DNA分子中具有特定生物学功能的片段称为基因（gene）。一个生物体的全部DNA序列称为基因组（genome）。基因组的大小与生物的复杂性有关，如病毒SV40的基因组大小为5.1×103bp，大肠杆菌为5.7×106bp，人为3×109bp。 三、DNA的功能 DNA mRNA 蛋白 转录 翻译 原核细胞 细胞质 细胞核 DNA 内含子 外显子 转录 转录后剪接 转运 mRNA hnRNA 翻译 蛋白 真核细胞 hnRNA 内含子 (intron) mRNA * mRNA成熟过程: 外显子 (exon) hnRNA（不均一核RNA):即mRNA的初级产物。P128 ?具有自身催化作用的RNA称为核酶 核酶通常具有特殊的分子结构，如锤头结构。 四、核酶和核酸酶 核酶是具有特殊结构的RNA。 RNA是核酶的功能部分。有些核酶的分子除了RNA外，还含有其它一些成份。例如蛋白质无机离子（Pb2+、Mn2+或Mg2+）等 1．核酶的组成和结构 核酶的作用底物基本上都是RNA分子，即RNA催化RNA。 核酶催化的反应主要包括：水解反应，连接反应和转核苷酰反应等。 2．核酶的催化作用 凡是能水解核酸的酶都称为核酸酶。 凡能从多核苷酸链的末端开始水解核酸的酶称为核酸外切酶；凡能从多核苷酸链中间开始水解核酸的酶称为核酸内切酶。 能识别特定的核苷酸顺序，并从特定位点水解核酸的内切酶称为限制性核酸内切酶（限制酶）。 核酸酶 一、核酸的一般理化性质 ?核酸具有酸性 粘度大 紫外吸收最大吸收峰为260nm 第六节 核酸及核苷酸的性质P155 二、 核苷酸的性质 一般性质 无色粉末或结晶 易溶于水，不溶于有机溶剂 有旋光性 2. 核苷酸的紫外吸收P157 由于嘌呤碱或嘧啶碱具有共轭双键，所以碱基、核苷及核苷酸在240 ~290nm有一强烈的吸收峰，其最大吸收值在260nm 3. 核苷酸的互变异构作用 碱基上带有酮基的核苷酸能发生烯醇式转化 酮式 烯醇式 氨基式 亚氨基式 在生理条件下，G、T、U三者倾向于形成酮式，而A与C一般采取氨基式存在更为稳定。 碱基上带氨基的核苷酸的互变异构作用 在理化因素作用下，DNA双螺旋的两条互补链松散而分开成为单链，从而导致DNA的理化性质及生物学性质发生改变，这种现象称为 DNA的变性。 引起DNA变性的原因：碱基堆积力和氢键受到破坏 引起DNA变性的因素主要有：①高温，②强酸强碱，③有机溶剂等。 二、DNA的变性P159 DNA的变性是核酸双螺旋区的多聚核苷酸链间的氢键断裂，变成单链结构的过程。 ①增色效应：指与天然DNA相比，变性DNA因其双螺旋破坏，使碱基充分外露，因此紫外吸收增加，这种现象叫增色效应。 ②生物学功能丧失或改变。 ③粘度降低. ④旋光性下降. DNA变性后的性质改变： DNA的变性温度：加热DNA溶液，使其对260nm紫外光的吸收度突然增加，达到其最大值一半时的温度，就是DNA的变性温度（解链温度，Tm）。 Tm的高低与DNA分子大小有关 Tm的高低与DNA分子中G+C的含量有关，G+C的含量越高，则Tm越高。 将热变性后的DNA溶液缓慢冷却，在低于变性温度约25～30℃的条件下保温一段时间（退火），则变性的两条单链DNA可以重新互补而形成原来的双螺旋结构并恢复原有的性质。 变性DNA在适当的条件下，使两条彼此分开的链重新形成双螺旋结构的过程，称为 DNA的复性。 三、DNA的复性与分子杂交P160 DNA的变性与复性 两条来源不同的单链核酸（DNA或RNA），只要它们有大致相同的互补碱基顺序，经退火处理即可复性，形成新的杂种双螺旋，这一现象称为 核酸的分子杂交。(P166) 核酸杂交可以是DNA-DNA，也可以是DNA-RNA杂交。 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * 核苷酸通过3’，5’-磷酸二酯键连接起来，以磷酸-糖-磷酸-糖…形成核酸骨架 5’ 5’ 3’ 3’ 一分子的核苷酸的3’-位羟基与另一分子核苷酸的5’-位磷酸基通过脱水可形成3’,5’-磷酸二酯键，从而将两分子核苷酸连接起来。 核苷酸的连接方式 5′端 3′端 核酸就是由许多核苷酸单位通过3’,5’-磷酸二酯键连接起来形成的不含