三氯苯酚降解相关基因的合成及功能分析——PsUGT2I基因.pdfVIP

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2016-05-08 发布于安徽
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三氯苯酚降解相关基因的合成及功能分析——PsUGT2I基因.pdf

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2．1PsUGT2I基因的合成…………………：…………………………………………．．23 2．2目的基因…………………………………………………………………………．25 2．3PsUGT2I的序列分析和蛋白分析…………………………………………………26 3．讨论……………………………………………………………………………………………………………………27 第三章目的基因在植物中的表达…………。．…．…．．28 引言………………………………………………………………………………………………………………………28 1材料与方法………………………………………………………………………………29 1．1材料…………………………………………………………………………………………………………．29 1．2方法…………………………………………………………………………………………………………．32 2结果与分析………………………………………………………………………………39 2．1PsUGT2I农杆菌转化双元载体的构建…………………………………………。39 2．2PsUGT2I基因的拟南芥转化……………………………………………………．40 2．3转基因拟南芥阳性植株的筛选…………………………………………………．41 2．4转基因拟南芥阳性植株的PCR验证……………………………………………43 2．5转基因拟南芥阳性植株的可溶性还原糖含量…………………………………．44 2．6转基因拟南芥阳性植株的降解TCP情况………………………………………．45 第四章目的基因在酵母中的表达． 47 引言…………………………………………………………………………………………47 1材料与方法………………………………………………………………………………．48 1．1材料…………………………………………………………………………………………………………．48 1．2方法…………………………………………………………………………………………………………．51 2结果与分析………………………………………………………………………………．．55 2．1酵母表达载体的构建……………………………………………………………．55 2．2质粒载体的线性化验证…………………………………………………………．．56 2．3酵母阳性克隆的筛选………………………………………………………………56 2．4 PsUGT2I蛋白浓度定量…………………………………………………………．57 2．5PsUGT2I的电泳检测…………………………………………………………………………………57 2．6 HPLC法鉴定降解情况……………………………………………………………58 3讨论……………………………………………………………………………………………………………………59 参考文献 61 致谢攻读学位期间发表的学术论文目录………………………………………………………………………………68 扬州大学学位论文原创性声明和版权使用授权书………………………………………………………．．69 边琳三氯苯酚降解相关基因的合成及功能分析—伽UGT2I基因三氯苯酚降解相关基因的合成及功能分析咄粥脚基因研究生：边琳导师：熊飞副教授，姚泉洪研究员 (扬州大学，江苏扬州，225009) (上海农业科学院，上海，201106) 摘要