光电子技术光电子技术在现代社会中的应用解析.pptVIP

7.4 光电子技术支撑着生物医学 生物医学是研究生命物质运动与健康工程的科学与技术，涉及到人类生活的方方面面：医疗、农业、工业、环境、能源……。 二、光镊 机械镊子挟持物体时必须要使镊尖接触到物体，施加一定的压力于物体，物体才会被钳住。 而在基因工程、细胞工程中，是要对DNA等生物大分子进行翻转、拉动、折叠等操作，对细胞进行切割和融和。这就必须能对活体粒子进行非接触的、温和的捕获、操控。 光镊（Optical Tweezers）是使微粒（几十纳米到几十微米）整个受到光的束缚以达到钳的效果，然后通过移动光束来迁移或翻转微粒。 光镊技术的原理 光对微粒产生梯度力，形成二维或三维光学势阱，从而实现对微粒的约束。 光携带能量和动量。光与物质相互作用，在交换能量的同时也交换动量。这就会使受光照的物体受到光辐射压力。 把细胞近似为小球，入射光波长等于或略小于细胞的大小。 光线进出小球将产生两次折射，由于生物细胞的折射率大都大于周围媒质的折射率，当光线入射到小球的右侧时，最后的出射光将向左方偏移。 进入和射出小球时光的动量分别为Pin和Pout，光动量的变化为ΔP，方向向左。 由动量守恒，光将施加给小球一个与ΔP等值反向的动量，即小球受到一个方向向右、偏下的力F。 均匀光场 非均匀光场 当小球处于均匀光场时，位于小球两边是对称的光线。 光线B施加给小球向右下方的力FB，而光线A施加给小球向左下方的力FA。 两个力合力的结果是该均匀光场施加给小球一沿光线传播方向的纵向力，而横向力为零。 当小球置于非均匀光场时，设位于小球右侧的光线B强于小球左侧的光线A，由激光光强和功率的关系可知，强光所产生的力大于弱光产生的力，即FBFA。这两束光线产生的合力将把小球推向右下方。当不考虑小球所受的其他外力时，小球将向较强的力的方向移动或被约束在非均匀光场中最亮的光线附近。这种由于光线强度分布不均匀产生的力，称为梯度力Fg。 基模激光的横向（垂直于激光传播方向）光强分布为高斯型，光强最强处位于光斑的中心。 若用基模激光照射微粒，粒子在梯度力作用下，将被推向光束中心。高斯光束对粒子形成二维光学势阱。 将光束聚集，光场的分布在垂直和平行于光的传播方向上均有梯度，则粒子在横向和纵向都将受到梯度力，合力指向光的最强处，即焦点。 当粒子中心和焦点间有偏离时，合力使粒子趋向焦点，这种梯度力就形成了三维光学势阱。 光穿过微粒时，也有一定的散射。粒子由此获得的力称为散射力Fs，它沿光的传播方向。微粒在梯度光场中受到的合力F=Fg+Fs，只有焦点附近的梯度力大于散射力时才可以稳定地捕获微粒。 激光形成的光学势阱能够捕获微粒，激光束移动使微粒也跟着移动，这被形象地称为光镊对微粒的挟持和操纵。 在已形成光镊的光为中心的一定范围内，微粒一旦落入这个区域就自动地移向光束中心，犹如落入光陷阱。已经落入阱中的微粒若没有强有力的外界扰动就不会偏离光学中心。 2.光镊的基本装置 光镊基本装置包括光镊光源（即捕获用激光）、光学耦合器、双色分束镜、显微物镜、样品台和一套观察、记录光镊工作的实时监测系统。 光镊光源一般选择近红外波段激光、具有高斯光束特征的TEM00基模光束。 功率选择考虑粒子的性质，尽可能以最小的功率工作， 一般为几毫瓦到几十毫瓦范围。 激光束经光学耦合器扩束整形，经双色分束镜反射至显微物镜，聚焦在样品池中形成光阱。 样品池装有微粒或细胞悬浮液，置于样品台上。样品台可X—Y方向平移。 光镊对微粒的捕获、操控的观察类似于普通的显微镜。照明光照亮样品池，池中微粒被捕获和操控的图像经显微物镜后透过双色分束镜，进入CCD摄像头，计算机采集图像在显示器显示。 3.光镊的基本操控功能 移动样品台，可使目标粒子滑入光阱，即被捕获。 固定光束（即光镊不动），沿X—Y平面操控样品台，则样品池移动而被捕获的粒子不动，即实现了光镊在横向操控微粒。 微调显微物镜，改变物镜与样品台的纵向相对位置，被捕获粒子随物镜移动，则实现了光镊对微粒的纵向操控。 X—Y面内移动样品台和微调显微物镜，等效于激光束的移动，而使装置简化可行。 光镊可直接操控的粒子从几十纳米到几十微米。 若要操控纳米微粒和生物大分子，可用间接操控方法。 间接操控方法利用光阱系统能清晰分辨的微米粒子作为“手柄”，将纳米微粒粘附在“手柄”上。光镊操控“手柄”就相当于操控了纳米微粒。 如右图， “手柄”采用1μm的聚苯乙烯小球，生物大分子粘附在小球上。光阱操控小球，就操控了生物大分子。 这种间接操控法使光镊操控范围扩展到纳米尺度，已成为一种有效的单分子纳米