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Module 4 :数据分析，基线和阈值设定
陈 涛
Field Application Scientist
Tel: 800 820 8982 / 400 820 8982
The world leader in serving science
1
基线、阈值线、Ct值
Ct 值
n
R
∆
阈值线
基线 Cycles
2
基线
• 基线就是扩增曲线的水平部分
基线 对数图谱 基线 线性图谱
3
自动设置基线
• 软件为每个样品都设置独立的基线
• 对于浓度跨度较大的样品，自动设置基线功能也可以计
算出准确的基线范围
4
自动设置基线是否会失败？
• Yes . . .
• 如果背景信号过高，软件可能会将背景信号误认为扩
增信号
• 这时，基线的范围会被设置的很小
解决办法:
手动设置基线
5
如何手动设置基线？
6
如何手动设置基线？
• 点击 .
• 选择基线设置不正确的反应孔，取消“Auto Threshold” 和
“Auto Baseline”选项
• 设置“Start /End Cycle” 为扩增信号出现的前一个循环
• 点击
7
阈值线
• 阈值是一个荧光强度值，穿过阈值与X轴平行的直线称为阈值线
• 告诉软件分析信号的位置
阈值线
Life Technologies 8
自动设置阈值线
• 软件会为每个基因设置一条阈值
• 这样是最理想的，因为不同的基因扩增出的信号大小和指数
期的位置会有所不同
9
如何手动设定阈值
指数增长期，重复性最好的位置
10
如何手动设定阈值
• 点击 .
• 选择基线设置不正确的基因，取消“Auto Threshold”
• 设置“threshold” 数值
• 点击
11
Que
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